临床样本DNA模板的常规制备方法.docxVIP

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  • 2020-12-13 发布于山东
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临床样本 DNA 模板的常规制备方法 一、 病毒标本中提取 DNA( 支原体、腺病毒 ) 处理方法 (1 )将擦拭过的咽拭纸放入 1.5ml 装有 1ml 生理盐水的 eppendorf 管中。 (2 )以 10,000r/min 离心 5 分钟,去上清液。 3 )沉淀物加入 30 ml TE 液混匀后煮沸 10 分钟, 4 ℃保存备用。二、 从细菌中提取 DNA 1 . NG (淋球菌) DNA 的提取 标本可取自尿道、生殖道或结膜分泌物。 (1 )取男性尿道口或女性宫颈处分泌物于事先加有 1ml 生理盐水的 eppendorf 管内。 (2 )振荡棉签或拭纸使 NG 释放出来。 (8 )加入 2 倍体积无水乙醇沉淀 DNA 。 (9 )去乙醇,空气干燥后加入 30μl的 TE 液,置 4 ℃冰箱保存备用。 2 . TB (结核杆菌) DNA 的提取 临床标本可来源于痰、 尿、支气管灌洗液、 胸水、腹水、心包积液等。 处理方法也不尽相同, 除痰标本外,其他标本大致相同。注意痰标本的留取一定要取次日早上的晨痰,留存器皿要无菌消毒,避免污染。 (1 )痰标本 TB DNA 的提取 ①挑少许痰液放入 1.5ml 的 eppendorf 管中,加入 5mo1/L NaOH 500μl 混匀,使痰液变稀,室 温中摇动 20 分钟。 ②加入 1mo1/L NaH

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