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核酸的生物合成和转录调控;一、中心法则
二、DNA的生物合成
三、RNA的生物合成
1.RNA的转录及加工
2.RNA的复制
3.RNA的转录调控;三、RNA的生物合成;DNA复制与转录的比较;基本概念;5’-----GCAGTACATGTC-----3’编码链 DNA
3’-----CGTCATGTACAG-----5’模板链
5’-----GCAGUACAUGUC-----3’ mRNA
N ------Ala--Val--His--Val------C 蛋白质;下列RNA 片段是以DNA 片段为模板合成,试写出此DNA 片段的有意义链和反意义链。
5’--C--A--m2G--U--G--C--A--U--C--G--3’
反意义链:3’--G--T--C--A--C--G--T--A--G--C 5’
有意义链:5’--C--A--G--T--G--C--A--T--C--G 3’;大肠杆菌DNA非模板链序列为:5’-ACTGTCAG-3’,其转录产物的序列是( )。
A. 5’-CUGACAGU-3’ B. 5’-UGACAGUC-3’
C. 5’-ACUGUCAG-3’ D. 5’-GACUUUTA-3’;结构基因(structure gene)
DNA分子中能转录出RNA的区段;不对称转录 DNA双链,仅一股链转录,另一股不转录。 有意义链与反意义链并非固定不变。 转录方向都是5’ 3’。; (1)RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶;①大肠杆菌RNA聚合酶的组成
全酶(holoenzyme)
α2ββ’σ (ω)
核心酶 (core enzyme)
α2ββ’ 参与转录的全过程
σ亚基(起始亚基)
亦称σ因子— 转录辅助因子 识别启动子
ω亚基功能未知
;大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图;全酶= α2ββ’(ω)σ 核心酶= α2ββ’
σ — 开始合成RNA链时必需有σ因子,
一旦合成开始即释放出来
β’— 参与酶与底物的结合,
以及与σ因子和核心 酶的结合
β — 参与σ因子和核心酶的结合,
并参与RNA合成的引发、 延伸
α — 与结合模板、酶的滑动及碱基识别有关;起始;转录泡;原核生物DNA转录时,识别启动子的因子是( )。
IF - 1??? B.RF - 1??? C.σ因子?? D.ρ因子;关于大肠杆菌RNA聚合酶的论述,错误的是( )。
A.该酶是一种含Zn2+的蛋白质
B.含有α、β、β'及σ四种亚基
C.β、β'亚基的功能完全一致
D.σ亚基有识别特别起始部位的作用
E. α2ββ‘称为核心酶;下列关于σ因子的描述( )是正确的。
A. RNA聚合酶的亚基,负??识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点
B. DNA聚合酶的亚基,能沿5′→3′及3′→5′方向双向合成RNA
C. 可识别DNA模板上的终止信号
D. 是一种小分子的有机化合物;②真核细胞RNA聚合酶
在DEAE-Sephadex柱上洗脱次序:酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
;类型
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
;真核细胞RNA聚合酶Ⅱ催化合成的RNA是( )。
A.rRNA B.mRNA C.tRNA
D.5SRNA E.18SRNA;(2)启动子(promoter)和转录因子;①原核生物启动子的特点:
DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)
-10bp处 -TATAAT- (Pribnow box)
-35bp处 -TTGACA-;原核生物的转录起始;;大肠杆菌启动子共有序列的功能;RNA聚合酶σ因子
识别及结合启动子,延长时脱落
不参与转录过程,是转录辅助因子
识别位点:启动子-35区、-10区;结合过程:
闭和的启动子复合体
RNA聚合酶(全酶)中σ因子在DNA双链
上迅速、随机滑动,寻找到启动子-35区,
形成疏松的复合物,DNA双链未解开。
开放的启动子复合体
RNA聚合酶(全酶)移向-10区和转录起始
;延长---- 转录泡RNA聚合酶(核心酶) ◆与DNA模板紧密结合,沿3’ 5’方向移动 ◆解旋作用:DNA解开 ◆聚合功能(不具外切酶功能) 杂交螺旋 ◆ RNA-DNA形成杂交螺旋 ◆ 转录产物RNA沿5’ 3’方向延长;弱的启动子可能完全没
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