几种含氮化合物与两种蛋白相互作用.pdfVIP

摘 要 众所周知，许多含氮化合物的药物分子不仅具有抗病毒和抗肿瘤的效果，而 且会引起蛋白质的结构变化，因此含氮化合物与蛋白质的相互作用成为研究者感 兴趣的课题之一。近些年，很多学者对辅酶、生物碱与蛋白质的作用进行了研究， 但依然存在以下问题：（1）辅酶的价格较高，生物合成条件苛刻，缺乏廉价易得 的制备途径；（2）合成的辅酶与蛋白质相互作用的机理研究不深入；（3）生物碱 和超氧化物歧化酶均具有抗氧化性，但二者联合作用效果尚不清楚。为此，我们 在前期研究的基础上： 1. 首先合成中间体溴代吡喃糖，其中用乙酸酐对糖上的羟基进行保护，结 果发现对于中间体的合成过程应缓慢加入原料、催化剂，最佳温度为20℃；然 后将中间体与烟酰胺进行糖苷化。烟酰胺的糖苷化溴代吡喃糖与烟酰胺的摩尔比 为2：1，在40-60℃温度范围内反应；最后使用氨的甲醇溶液进行脱保护，在-3℃ 反应16h，产率为45%，有效降低了辅酶的生产成本。 2. 使用紫外和荧光分析技术研究烟酰胺衍生物与人血清白蛋白的关系。研 究发现烟酰胺衍生物与人血清白蛋白（HSA）形成复合物引起HSA 的荧光猝灭。 通过计算不同温度下的结合位点数n 和结合常数Ka、相应的热力学参数、自由 能变化 （ΔG）、焓变 （ΔH）和熵变 （ΔS）等，发现范德华力和氢键在稳定配 合物中起主要作用。 3. 研究了三种生物碱可可碱 （TP）、异可可碱 （TB）、咖啡碱 （CF）以及超 氧化物歧化酶（SOD）的抗氧化作用。TP、TB、CF 和SOD 均可降低细胞中MDA 的含量，形成的TP-SOD，TB-SOD 和CF-SOD 可以叠加提高抗氧化能力。基于 紫外光谱，荧光光谱和分子对接技术，研究了TP/ TB/CF 与SOD 之间的相互作 用，发现氢键和范德华力稳定了TP/ TB/CF 和SOD 与1:1的配合物；同时在形 成的复合物中SOD 结构发生了变化。 I 本研究探讨了辅酶类似物的合成方法，并证明辅酶类似物对人血清白蛋白可 产生静态猝灭；同时发现生物碱与SOD 形成复合物可以起到协同抗氧化作用。 关键词 烟酰胺衍生物；生物碱；人血清白蛋白；超氧化物歧化酶；相互作用 II 目 录 摘 要I ABSTRACTIII 目 录V 第一章 绪论1 1.1 概述1 1.2 几种含氮化合物的相关研究3 1.2.1 烟酰胺的相关研究3 1.2.2 生物碱的相关研究5 1.3 生物大分子7 1.3.1 超氧化物歧化酶的介绍7 1.3.2 人血清白蛋白的介绍9 1.4 相互作用10 1.4.1研究方法10 1.4.2 药物分子与超氧化物歧化酶12 1.4.3糖苷化合物与血清白蛋白13 第二章 化学法合成烟酰胺衍生物14 2.1引言14 2.2 实验部分16 2.2.1主要实验仪器及分析仪器16 2.2.2 实验药品16 2.3烟酰胺木糖苷，烟酰胺葡萄糖苷的合成17 2.3.1 中间体的合成17 2.3.2 烟酰胺三乙酰糖苷17 V 2.3.3烟酰胺糖苷的合成18 2.4 结果与讨论18 2.4.1结构表征18 2.4.2 条件讨论20 2.5 结论23 第三章 光谱法研究烟酰胺衍生物与人血清白蛋白的相互作用24 3.1引言24 3.2 实验部分24 3.2.1主要实验仪器及分析仪器24 3.2.2 药品及试剂25 3.2.3 溶液配制25 3.3 实验内容25 3.3.1 紫外线吸收测量25 3.3.2 荧光测量26 3.4 实验结果26 3.4.1 紫外研究26 3.3.2 荧光研究结果27 3.5 结论30 第四章 光谱法可可碱，异可可碱，咖啡碱与超氧化物歧化酶的相互作用32 4.1引言32 4.2 实验部分33 4.2.1 主要实验仪器及分析仪器33 4.2.3 试剂配制34 4.3 实验内容35 4.3.1紫外线吸收测量35 4.3.2 荧光测量35 4.3.3Cu/Zn-SOD 活性的测定36