基于三苯胺基丙二腈衍生物的荧光探针在氰化物的检测和生物成像中的应用.pdfVIP

摘 要 光化学技术作为一种常用的定性定量的分析方法，在阴离子检测中具有广泛 应用。其中光化学探针因其制备简单、操作方便、性能稳定且能够实现对目标物 的灵敏特异性检测，被广泛应用于临床、环境和食品检测等各个领域。氰离子   （CN ）是一种剧毒阴离子，微量CN 进入体内能迅速与细胞色素氧化酶键合， 阻碍电子传输从而引起呕吐、抽搐、神志不清甚至死亡，世界卫生组织规定饮用  水中CN 浓度不能超过 1.9 μM。因此，基于灵敏而选择性的荧光探针构建光化  学传感器应用于食品、水体和生物体系的CN 的检测，具有重大意义。 本论文改变荧光探针的结构，调控其对氰化物的响应性质，设计合成了三种 荧光探针：三苯氨基丙二腈荧光探针（TPA-MT ）、三苯氨基-苯并噻二唑-丙二 腈荧光探针（TPA-BTD-MT ）和三苯氨基-2,3-二苯基喹喔啉-丙二腈荧光探针  （TPA-DPQ-MT ）。逐层深入地比较了三种荧光探针对CN 的响应，荧光响应信 号从关闭型（turn-off ）转变成更加灵敏专一的开启型（turn-on ）。系统研究了三  者与CN 的作用机理，并构建了能用于食品、细胞成像、生物活体氰化物检测和 监测的新型荧光化学传感器。该传感器展现了良好的灵敏度和检出能力，并具有 能用于细胞、活体生物成像功能。主要内容如下： 1. 以三苯胺为电子给体、丙二腈为电子受体、苯基为桥，设计了光化学探  针TPA-MT 。通过紫外光谱及荧光光谱测研究了TPA-MT 对CN 的响应特性。结   果表明在四氢呋喃（THF ）中，TPA-MT 对CN 具有较好地选择性，且随CN 浓 度的增加，荧光强度逐渐降低，呈现“turn-off ”的响应特性。通过核磁共振氢谱  和Job 曲线的测定，揭示两者发生反应的络合比为1:1。TPA-MT 对CN 的标准 曲线测定显示其在线性范围0.25-6.0 μM 内，检出限为0.093 μM，并可应用于对 发芽土豆中氰苷含量的测定，表明此探针分子具有一定的实用性。Beas-2B 细胞 内氰化物成像研究表明，TPA-MT 在细胞内具有一定的细胞膜通透性，当 CN  存在时，荧光减弱，借此可实现细胞水平上CN 的监测。  2. 为调控TPA-MT 对CN 的响应特性，引入缺电子苯并噻二唑基团（BTD ）， 设计了新的荧光探针分子 TPA-BTD-MT 。BTD 基团不仅提供了有效的共轭体 I 系，而且降低了二氰基乙烯基-碳上的电子密度，增加了该位点的亲电性。从而  使得CN 在TPA-BTD-MT 探针上二氰基乙烯基-碳上的亲核加成比TPA-MT 更  加灵敏。通过紫外光谱及荧光光谱分析，结果显示，随 CN 浓度的增加， TPA-BTD-MT 的荧光强度呈现明显地“turn-on ”响应特性。通过紫外、荧光、  核磁、密度泛函理论（DFT ）等方法研究TPA-B