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基因工程(三)
人组织纤溶酶原激活 htPA
人组织纤溶酶原激活 htPA基因母羊的羊
物(htPA )是一种重要的药用蛋白,可在转
乳中获得。流程如下:
(1) 重组表达载
重组表达载体
基因
? 质粒
卵(母)细胞
受箱卵早期胚胎
代孕母羊 转拉用基因母羊羊乳
htPA基因与载体用 切割后,通过DNA连接酶连接,以构建
体。检测目的基因是否已插入受体细胞 DNA可采用 技术。
(2) 为获取更多的卵
(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其
采集的精子需要经过 ,才具备受精能力。
(3) 将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 。为了获得母羊,移植前需
对已成功转入目的基因的胚胎进行 。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转
基因个体,这体现了早期胚胎细胞的 。
(4)若在转ht?PA基因母羊的羊乳中检测到 ,说明目的基因成功表达。
2.
F面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。
转化射胞工程苗
转化射胞
工程苗
请据图回答:
⑴获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在 酶的催化下,合成互补的
单链DNA然后在 作用下合成双链DNA从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质
的 序列推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的.
序列,再通过化学方法合成所需基因。
⑵利用PC敲术扩增DNA寸,需要在反应体系中添加的有机物质有
4种脫氧核背酸三磷酸和耐热性的
4种脫氧核背酸三磷酸和耐热性的
DNA聚合酶,扩增过程可以在PCRT增仪中完成。
(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为
⑷在基因工程中常用Ca2+处理D,其目的是
2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖.工业上青蒿素一般从青蒿植株中
提取,产量低,价格高.基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路. 科
学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后, 偶然发现一株高产植株.通过基因测序发现该高产
植株控制青蒿素合成相尖的一种尖键酶的基因发生了突变.
(1 )提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用 PCR技术,该
技术的原理是 ?
(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCF扩增,进
T 30个循环后,理论上可以产生约为 个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个
受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的 ,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序
将获得的突变基因导入普通图I
将获得的突变基因导入普通图I、2中箭头表示相尖限制
(3)
青蒿之前,先构建基因表达载体,
酶的酶切位点.请回答:
nMDNA
nMDNA
构建好的重用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Smal切割,
构建好的重
组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是 识别结合位点.
(4) 检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取 技术.
目的基因导入组织细胞后,
通过 技术培育出青蒿幼苗.
4.
阅读如下材料:
材料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中, 得到了体型巨大的“超级小鼠”;
科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性‘ 科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造‘ 使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸‘在该半胱氨酸与第97位的半胱氨
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a. DDgg b. Ddgg
②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括 (选填选项前的符号)。
a. DDGG b. DDGg c. DdGG d. DdGg
(3)杂交后,出现红?绿荧光(既有红色又有绿色荧光)胚胎的原因是亲代 (填
“M‘或“ N)的初级精(卵)母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的
发生了交换,导致染色体上的基因重组。通过记录子代中
红?绿荧光胚胎数量与胚胎总数,可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例,
算式为 。
基因工程(三)
【答案】(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) ;DNA分子杂交(或核酸探针)
(2)超数排卵; 获能(处理)(3)显微注射法; 性别鉴定; 全能性
(4) htPA (或人组织纤溶酶原激活物)
〔答案】(1)逆转录酶DNA聚合酶 氨基酸 脱氧核昔酸 (2)引物(目的基
因或A基因)模板(3)基因表达载体(4)使其成为感受态细胞,使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子
〔答案】(1) DNA双链复制(2) 230 cDNA文库(或部分基因文库) 不同
(3) Smal会破坏质粒的抗性基因及外源 DNA中的目的基因(答对一个即得分) RNA聚
合酶
(4) 抗原抗体杂交 植物组织培养
〔答案】(1)显微注射法 限制性内切酶D
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