高一实验二还原糖脂肪蛋白质的鉴定.pdfVIP

学习必备 欢迎下载 高一生物 实验二 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴 定 实验点拨 1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。化学中被鉴定的物质与 所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化 学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应. ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热) ②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察) ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A 液NaOH 溶液再加B 液CuSO4 溶液) 2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。 以苹果,梨为最好。且先要制备组织样液。研磨时，可加石英砂和水一起研磨。 3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。 斐林试剂的配制过程示意: 斐林试剂甲液 ( 0.1 g/m 的 NaOH 溶液) 斐林试剂乙液 ( 0.05 g/m 的 CuSO4 溶液) 4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放 入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者， 以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹， 使试管底部离开大烧杯中的开水。 5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的 颜色变化作对比，这样可以增强说服力。 6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。实验前浸 泡 3h～4h （浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成 形），最适宜切片。 7、实验中学生应分工合作。在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制 备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。在“脂 肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。另外，在完 成前两个实验时，一个学生洗刷试管、清洗玻片和整理显微镜，另一个学生则可以进行后一 个实验的操作。 8、蛋白质的鉴定实验：可用浸泡1d～2d 的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液). 9、双缩脲试剂的使用,一定要先加入A 液(即0.1 g/m 的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试 剂B 液(即0.01 g/m 的 CuSO4 溶液). 10、还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起 是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起. 实验报告 ［提出问题］ 学习必备 欢迎下载 1、怎样鉴定生物组织中的还原糖？斐林试剂怎样配制和使用？ 选材；制备组织样液；取组织样液；加斐林试剂 (由斐林试剂甲液和乙液充分混合而 成,不能分别加入)；水浴加热；观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色. 结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀 2、脂肪的鉴定实验中，如何观察？若有脂肪，可观察到什么现象？ 取材；切片；滴苏丹Ⅲ染液染色、去浮色、制成临时装片； 观察：先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察. 结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色. 3、蛋白质的鉴定使用什么试剂？与斐林试剂相比有哪些相同点和不同点？ 双缩脲试剂；斐林试剂和双缩脲试剂的比较 相同点: ①都由NaOH 溶液和CuSO4 溶液构成; ②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A 都为0.1g/mL NaOH 溶液. 不同点: ①CuSO4 溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为 0.05 g/mLCuSO4 溶液,双缩脲试剂 B 为 0.01g/mLCuSO4 溶液. ②配制比例不一样. ③使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴 定材料加入A 试剂摇匀后,再加入试剂B. ④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质. ⑤反应本质及颜色反应不一样. ［用品准备］ 1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织,以苹