91型法医鉴定及亲子鉴定试剂盒产品说明书..docVIP

前 言 本试剂盒采用多色荧光标记、 多重 PCR复合扩增方法对人基因组 DNA 中 STR 位点的多态性进行检测，通过分析扩增结果来确定血样、精斑、 牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。 AGCU10+1 STR荧光检测 试剂盒可以进行 11 个 DNA位点（ 10 个 STR位点和 1 个性别位点） 的同步 扩增并利用四色荧光技术进行检测。本试剂盒包含的 DNA 位点有 Amelogenin 、D3S1358、D13S317、D7S820、 D16S539、D8S1179、D21S11、D18S51、 vWA、 D5S818、 FGA。 试剂盒规格 本试剂盒可供 200 次样品实验。 试剂盒组成 扩增前试剂盒 Reaction Mix 1000 μ l × 2 支 含 PCR缓冲液、 MgCl2 和 dNTPs Primers 10+1 1000 μ l × 1 支 含 11 个位点的 11 对引物 热启动 酶 100μ l × 1 支 5 U/ μ l Control DNA 9947A 200μ l × 1 支 含 0.1ng/ μ l 9947A 基因组 DNA sdH2O 1500 μ l × 1 支 超纯水 扩增后试剂盒 10+1Allelic 50μ l ×1 支 含 11 个位点的等位基因（见附表） Ladder AGCU Marker 250μ l × 1 支 荧光分子量内标 ROX-450 实验所需主要仪器设备 PCR扩增仪、 ABI 遗传分析仪（ 310、3100、3130 等）、高速离心机、洁净  工作台、微量移液器、冰箱、紫外分光光度计、电炉或恒温水浴锅。 试剂盒使用方法 ( 试剂使用前请轻微振荡，并短暂离心 ) DNA 提取及定量 待检样品先用磁珠法或 Chelex-100 法提取基因组 DNA，提取的样品基因组 DNA定量在约 0.1ng/ μl~0.5 ng/ μ l 。 2. PCR 反应 按如下过程实验： PCR反应体系 基因组 DNA模板 10 μ l （含基因组 DNA约 2ng） Primers 10+1 5 μ l Reaction Mix 10 μ l 热启动 酶 0.5 μl 总体积 25 μ l 每次实验都要求同时做阴性对照和阳性对照 PCR循环参数 初始变性 热循环 终延伸 保 温 10 个循环： 94℃ 1 分钟， 9 95 ℃11 分钟 62℃ 1 分钟， 72℃ 1 分钟 4℃维持 20 个循环： 94℃ 1 60℃， 45 分钟 分钟， 60℃ 1 分钟， 72℃ 1 分钟 3. 电泳检测 取 2μ l PCR 产物或 10+1 Allelic Ladder 分别与 0.5 μ l AGCU Marker ROX-450和 15μ l 去离子甲酰胺混合， 95℃变性 5 分钟后立即冷却用于电泳检测。 （ Matrix 标准品由 FAM、HEX、TAMRA、ROX组成，位点基因分型数据软件由 我公司免费提供） 附表 . 11 个 DNA位点信息 位 点 荧光标记 10+1 Allelic Ladder 中的等位基 9947A 基因型 因 Amelogenin FAM X,Y X ,X D3S1358 FAM 12,13,14,15,16,17,18,19 14,15 D13S317 FAM 8,9,10,11,12,13,14,15 11,11 D7S820 FAM 6,7,8,9,10,11,12,13,14,15 10,11 D16S539 FAM 5,6,8,9,10,11,12,13,14,15 11,12 D8S1179 HEX 8,9,10,11,12,13,14,15,16,17, 13,13 18,19 24,24.2,25,26,27,28,28.2,29, D21S11 HEX 29.2, 30,30 30,30.2,31,31.2,32,32.2,33, 33.2,34,34.2,35,35.2,36,37 10,11,12,13,14, D18S51 HEX 15,16,17,18,19, 15,19 20,21,22,23,24,25,26 vWA TAMRA 11,12,13,14,15,16,17,18,19,2 17,18 0,21 D5S818 TAMRA 7,8,9,10,11,12,13,14,15 11,11 FGA TAMRA 18,19,20,21,22,23,24,25, 23,24 26,26.2,27,28,29,30 注意 ： 本试剂盒有效期为一年，生产日期及批号见产品包装。  建议用量少的用户小管分装后冻存。 试剂盒的详细使用说明请查阅 AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒用户手册