高考生物大一轮复习分层提能限时练微生物的培养与应用新人教.docxVIP

分层提能限时练 ( 三十七 ) 微生物的培养与应用 ( 限时： 45 分钟) 1．(2015 ·全国卷Ⅰ ) 已知微生物 A 可以产生油脂，微生物 B 可以产生脂肪酶。脂肪酶 和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题： 显微观察时，微生物 A 菌体中的油脂通常可用 ________染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发，可选用 ________( 填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法” ) 从菌体中提取。 为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物 B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 ________为碳源的固体培养基进行培养。 (3) 若要测定培养液中微生物 B 的菌体数，可在显微镜下用 ________直接计数；若要测 定其活菌数量，可选用 ________法进行计数。 (4) 为了确定微生物 B 产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在 35 ℃、 40 ℃、 45 ℃温度下降解 10 g 油脂所需酶量依次为 4 mg、 1 mg、 6 mg，则上述三个温度中， ________℃条件下该酶活力最小。 为了进一步确定该酶的最适温度， 应围绕 ________℃设计 后续实验。 【解析】 (1) 油脂可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染液染成红色，因此油脂通 常用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色。 不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取， 水蒸气蒸馏法一般用 来提取易挥发的物质。 (2) 能产生脂肪酶的微生物 B 能利用脂肪 ( 油脂 ) 作为碳源，所以在制备选择微生物 B 的 培养基时，应将油脂作为唯一的碳源。 用显微镜直接对微生物进行计数，需要用血细胞计数板。如果对活菌进行计数，则 要用稀释涂布平板法涂布平板，培养后统计菌落数目，然后计算出活菌数量。 (4) 降解等量 的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中 45 ℃下酶的活 力最小。从三种温度下的实验结果可知， 40 ℃下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适 温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后续实验。 【答案】 (1) 苏丹Ⅲ ( 或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2) 油脂 (3) 血细胞计数板 稀释涂布平 板 (4)45 40 2．(2015 ·江苏高考 ) 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提 高秸秆的营养价值。 为了增强发酵效果， 研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株， 并对其 降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题： 在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是______( 填序号 ) 。 ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水 (2) 在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 ______ _______________________________________________________________ 。 向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的 1 原因是 ____________________________________________________ ______________________________________________________________ 。 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤 维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在 刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落 ( 见 下图 ) 。图中降解圈大小与纤维素酶的 ______ 有关。图中降 解纤维素能力最强的菌株是 ______( 填图中序号 ) 。 (5) 研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4， 在不同温度和 pH 条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株 ______更 适合用于人工瘤胃发酵，理由是 ________________________________________________ 。 【解析】 (1) 在样品稀释和涂布平板过程中，需要在酒精灯火焰附近进行操作，培养皿用于盛放培养基并培养细菌，无菌水做稀释的溶剂，此处唯一用不到的是显微镜。 在涂布平板时，要取少量菌悬液滴加到培养基表面，因为如果滴加菌悬液量过多，菌悬液就会堆积在培养基表面影响分离效果。 在向试管内分装含琼脂的培养基时，如果试管口粘附有培养基，就很容易使棉塞受 到污染，因此，需要用无菌的酒精棉球将试管口擦拭干净。 因为刚果红可以与纤维素形成红色复合物，且不与纤维素降解产物反应。所以在刚 果红培养基平板上， 菌落周围有透明降解圈是纤维素被降解的结果， 降解圈大小由纤维素酶的活性和量决定。图中菌落①周围的降解圈最大，因此其降解纤维素的能力最强。 考虑到人工瘤胃的发酵过程会使发酵液酸性增加，温度升高，在这个前