探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化.pdfVIP

§探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 一． 材料用具：酵母菌贮用培养液、无菌葡萄糖溶液、血细胞计数板、盖玻片、移液管、 滴管、有螺旋盖的试管、试管架、记号笔、直尺、坐标纸、比浊计（比色计）、显微镜。 二． 材料简介： 1. 选用酵母菌的原因：1.酵母菌是单细胞真核生物； 2.生长周期短，繁殖速度快，世代间不重叠。 2.血球计数板： 具体操作方式：用滴管从试管中取 1 滴培养液到血球计数板的方格区，盖上盖玻片 ， 让培养液自行渗入。（多余的培养液用滤纸吸去） ★计数板： 五点取样法 1 个大方格=16 个中方格 =400 个小方格（16×25） 3. 比浊计（比色计）：测定溶解度。 三.实验步骤 Ⅰ . 配置样品并分组（配置 2 个样品）：用记号笔标记有螺旋盖的试管 A 、B； A 组（10mL 无菌葡萄糖溶液+0.1mL 酵母菌贮用培养液） B 组（10mL 无菌葡萄糖溶液） 注：酵母菌可以用液体培养基培养。 Ⅱ . 细胞计数（抽样检验方法） 1.拧紧试管盖将试管 A 轻轻震荡几次（ 目的：使酵母菌分布均匀，减少误差）。 2. 用滴管从试管中取 1 滴培养液到血球计数板的方格区，盖上盖玻片，让培养液自行 渗入。静待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在显微镜的载物 台上，计数一个小方格内的酵母菌数量。 3.试管 B 重复该步骤； 4.样品 2 重复 2、3。 ★ 计数注意事项： 细胞总数计算方法： 每方格内细胞数（细胞数÷方格数）×2500×10 2500 ：每方格体积=2mm×2mm×0.1mm=0.4mm2 1mL=1cm2=1000mm2 1000÷0.4=2500 个（每毫升方格数） 10：一试管大约为 10mL。 盖 1.计数顺序：左上 右上 右下 左下； 2.压在方格线上的细胞，只计左线和上线上的细胞数； 3.细胞间若有粘连（死亡），则数出团块中的每一个细胞； 4. 出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的 1/2，则算独立个体 。 芽体 出芽生殖——无性生殖 5.用比浊计测定各试管的浑浊程度（探究酵母菌数量变化与其浑浊度之间的关系） 6.记录数据，求平均值 时间 1 2 3 4 5 6 7 组别 样品 1 样品 2 平均 Ⅲ . 培养 1.第 2 天，重复 1-5，在坐标纸上标记当天样品的浑浊度读数与酵母数。用直尺连接两 个标记点，依据此线的延长线估算此后两天的酵母数量。 2.第 4 和第 7 天进行计数，每天用比浊计测定混合度并记录。（也可每天计数） ★ 注：1.每天计数酵母菌的时间要固定； 2.若方格内细胞数目多于 300 个或数不过来，则稀释（详见书 P73） Ⅳ . 整理数据，绘制种群数量变化曲线 105~109 图一.酵母菌数量变化及其浑浊度的关系（横坐标：浑浊度（0~100）