CD44靶向生物可降解纳米药物探索.docVIP

CD44靶向生物可降解纳米药物探索 摘 要：我们制备了基于 1,2-二硫戊环三亚甲基碳酸酯(DTC)和三亚甲基碳酸酯(TMC)的生物可降解两亲性聚合物PEG-P(TMC-DTC) 和Mal-PEG-P(TMC-DTC)，并对聚合物进行了完整的表征。之后按照不同的聚合物比例(PEG-P(TMC-DTC) ：Mal-PEG-P(TMC-DTC)=9：1，8：2，7：3)制备了三种聚合物囊泡。然后通过pH梯度法将亲水性抗癌药物阿霉素盐酸盐(DOXHCl)包载到聚合物囊泡内。最后，我们用末端硫基官能化的透明质酸(HA-SH)对聚合物载药囊泡进行表面后修饰，增加其靶向肿瘤细胞的能力。我们对后修饰的聚合物载药囊泡(HA-Ps-DOX)进行了性质检测，包括载药量和包封率的计算、粒径及表面电荷数测试，还进行了包括长期存放，稀释，生理盐水等情况的稳定性测试，除此之外，还进行了聚合物载药囊泡的体外简单模拟释放实验，比较其在正常生理环境和肿瘤环境下的药物释放效率。通过综合考虑聚合物的性质、纳米药物的载药量和包封率、粒径及表面电荷数、纳米药物的稳定性以及药物释放行为，我们认为该聚合物囊泡具有成为CD44靶向的纳米药物的可能性。 关键词： CD44靶向，纳米药物，聚合物囊泡，透明质酸，生物可降解 1 引言 目前，包括我国在内，世界范围内有很多人都受到癌症的威胁，严重影响了生活质量。目前癌症的治疗方法主要包含化疗、热疗、中医治疗等等几种方法，然而这些方法都有各自的缺陷，有些会产生严重的副作用，从而导致患者的机体受到损害，生活质量逐渐下降;有些则是因为本身特异性过低，而难以达到高效、准确的治疗。 近年来，越来越多的学者开始关注并从事研究纳米药物在肿瘤，尤其是而恶性肿瘤治疗中的使用[1-2]，尤其是用聚合物纳米粒子作为药物载体而制作的聚合物纳米囊泡药物，因为它具有能更好的被机体吸收，产生相对的低排异反应，延长体内循环时间等优于以往治疗方法的特性。除此之外，纳米药物还具有高渗透长滞留(ERP)效应，可以提高药物在机体组织中的选择性分布，达到高特异性[3-4]。.不仅如此，由于纳米囊泡药物可以针对肿瘤细胞进行特定点释放，使用的药量和之前相比也大为减少，从而降低了毒副作用。从各方面来说，纳米囊泡药物都具有研究价值和发展前景。 一般使用的纳米药物，其载体的尺寸一般在20-200 nm之间，纳米聚合物囊泡是常见的载体之一[5-6]，聚合物囊泡具有可控的粒径，其天然的水质内腔被疏水的壁膜所保护，可装载亲水药物和疏水药物，是药物传递领域最有发展潜力的纳米载体之一[7-8]。和脂质体相比，囊泡具有独特的优势如其膜更厚实、稳定性更好、膜的物理性质可调等[7、9-10]。囊泡是通过具有两亲性的聚合物相互作用而形成的，当亲水链段一定的质量分数比内(15%-40%)时，聚合物会形成一种具有亲水内腔以及疏水的双层分子层的囊泡，而这个囊泡还有疏水链段在外表面，这可以使囊泡和大部分介质隔离开，保护里面的药物，而在外表面的亲水链段则确保了囊泡具有生物相容性，不仅如此，这个囊泡在疏水层间和亲水内腔中均可以载药，这扩大了载入药物的选择范围。 聚合物纳米囊泡药物若要投入到实际的临床肿瘤治疗中，必须要具备几个特征，如可以长时间在体内循环，不会过早释放分解;当载药囊泡到达肿瘤部位时，可以高效识别并释放，具有较高的有效药物浓度;在药物释放后，囊泡本身可快速降解并且降解产生的物质对人体无毒副作用。因此，制备的纳米囊泡药物，不仅在结构上要符合要求，在稳定性和释放率等方面也要达到相应的标准。 在此之前，已近有很多纳米药物投入了临床-治疗中，如NK105、NC6004等[3]。虽然纳米囊泡药物有如此之多的优异之处，但它仍然存在很多问题，比如很多药物远远达不到我们所预期的载药量，这主要归咎于在体内循环的低稳定性，导致药物在到达肿瘤细胞之前就已经释放，从而使特异性靶向性等下降，又或者是囊泡对于肿瘤环境的检测灵敏性过低，药物到达后仍然不释放，这也降低了肿瘤组织周围低有效药物浓度[11-12]。 我们了解到，在肿瘤细胞中GSH的浓度大约是正常细胞及体液中的100-1000倍[13]，因此，可以快速的对GSH在肿瘤细胞和正常机体环境的浓度差做出响应也成为了纳米囊泡药物的要素之一。我们课题组制备的聚合物PEG-P(TMC-DTC)中，DTC所含双硫键对GSH具有还原敏感的特性，能够高效响应肿瘤和正常环境的巨大浓度差。这种还原敏感特性可能会大大提高纳米囊泡药物的识别能力和释放效率。 透明质酸(HA)是一种在广泛地存在于体内的糖胺多糖(是D-葡萄糖酸(1--3)和N-乙酰基D-葡糖胺(1--4)的重复二糖单元的巨大聚合物)，在维持细胞的外基质结构