生物化学：3-第四章 DNA知识的实际应用-zhou-05-22.pptVIP

（二）非病毒载体 1. 裸DNA 2. 脂质体/DNA复合物 3. 多聚物/DNA复合物 4. 其它方法 1. 裸DNA 方法：直接注射或基因枪轰击 溶液类型对基因表达有影响： 重组DNA可贮存于5%-30%的蔗糖溶液中 也可用生理盐水或PBS 2. 脂质体/DNA复合物 形成高效包装DNA的人造膜，与细胞膜极为相似。 形成脂质双层包围水溶液的脂质微球，与细胞融合后被细胞内吞。 无毒性和免疫原性 可生物降解，不会在体内堆积 可制成球状(0.03-50 ?m)，包容大小不同的生物分子 可带有不同的电荷 具有不同的膜脂流动性、稳定性、及温度敏感性，能适应不同的生理要求 人工脂质体膜具有如下特点 阳离子多聚体 DNA带负电 细胞表面带负电 3. 多聚物/DNA复合物 靶向纳米载体-基因类药物 Dr. Liu 受体介导基因转移技术 磷酸钙共沉淀法 电穿孔法 显微注射法 4.其它方法 五、基因治疗关键问题 1.靶向性基因导入系统 基因治疗的关键问题是将治疗基因送入特定得靶细胞，并在该细胞中得到高效表达； 2.外源基因表达的可控性 导入基因后无调控表达将会产生严重后果。最理想的可控性是模拟人体内基因本身的调控形式； 3.治疗基因过少 * * * * * * * * * * * * * * * * * * （3）延伸 70-75oC， 延伸时间由