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茶树叶细胞壁富集氟机制研究 目 录 摘 要i ABSTRACTiv 缩略语表viii 1 课题提出和研究进展1 1.1 课题提出1 1.2 研究进展4 1.2.1 氟对茶树生理生化代谢的影响4 1.2.2 茶树细胞壁对氟的固定作用8 1.2.3 茶树累积氟与其他离子的相互作用12 1.3 研究目的和研究内容14 1.3.1 研究目的14 1.3.2 研究内容15 2 茶树叶片响应氟胁迫的代谢组学研究16 2.1 前言16 2.2 材料和方法16 2.2.1 材料与试剂16 2.2.2 仪器与设备17 2.2.3 实验设计18 2.2.4 不同浓度氟处理茶树生理指标及氟含量变化19 2.2.5 不同浓度氟处理茶树叶片GC-TOF-MS分析20 2.2.6 不同浓度氟处理茶树叶片细胞壁果胶含量测定20 2.2.7 氟对茶树叶片果胶合成通路相关酶基因表达的影响21 2.2.8氟对茶树叶片果胶合成通路相关酶活性的影响23 2.2.9 数据分析24 2.3 结果与分析25 2.3.1不同氟处理茶苗叶片的鲜重，干重，过氧化氢及丙二醛含量变化...25 2.3.2 不同浓度氟处理茶苗叶片氟含量的变化26 2.3.3 不同氟浓度条件下茶树叶片的非靶标代谢组学研究27 I 华中农业大学2020 届博士研究生学位 （毕业）论文 2.4 讨论35 3 不同氟处理茶树叶细胞壁结构组成变化与富集氟的关系39 3.1 前言39 3.2 材料和方法39 3.2.1 材料与试剂39 3.2.2 仪器与设备41 3.2.3 实验设计41 3.2.4 不同浓度氟处理茶树叶片细胞壁及其组分氟含量测定41 3.2.5 细胞壁金属元素和B 元素含量测定42 3.2.6 不同氟处理茶树叶片细胞壁糖类物质含量分析43 3.2.7 细胞壁结构的透射电镜观察和傅里叶变换红外光谱分析45 3.2.8 果胶结构的免疫组化观察46 3.2.9 数据分析47 3.3 结果与分析47 3.3.1 氟对茶树叶片细胞壁及其组分氟含量的影响47 3.3.2 氟对茶树叶片细胞壁金属离子和B 离子稳态的影响49 3.3.3 氟对茶树叶片细胞壁多糖和单糖含量的影响52 3.3.4 不同氟浓度条件下茶树叶片细胞壁结构的TEM 观察54 3.3.5 不同氟浓度条件下茶树叶片细胞壁结构的FT-IR 观察55 3.3.6 免疫组化染色观察氟对茶树叶片细胞壁果胶结构的影响57 3.4 讨论59 3.4.1果胶是茶树叶片细胞壁结合氟的主要部位59 3.4.2 茶树富集与耐受氟与其叶片细胞壁离子稳态的变化密切相关60 3.4.3 茶树富集与耐受氟与其叶片多糖含量的变化密切相关61 3.4.4 茶树叶片细胞壁富集氟与果胶的甲基酯化结构特性密切相关62 3.4.5 茶树在高浓度和低浓度外源氟条件下可能具有不同的氟累积和耐受 机制63 4 钙调控茶树对氟的累积65 4.1前言65 II 茶树叶细胞壁富集氟机制研究 4.2 材料和方法65 4.2.1 材料与试剂65 4.2.2 仪器与设备66 4.2.3 实验设计66