生物选修Ⅰ人教新课标2-3分解纤维素的微生物的分离课件（14张）.pptVIP

课题3分解纤维素的微生物的分离 课题背景 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，其纤维素的质量分数可达92%～95%，亚麻、木材、作物秸秆等也富含纤维素。许多商品纤维素都是由天然纤维素制得的。用分解纤维素的微生物处理后，纤维素可分解成糖。它不仅可以供给人们能量，还可以用于酿酒、酿醋等食品加工业，成为葡萄糖的替代品。 在土壤中有许多能利用和分解纤维素来作为能源的微生物，因为它们含有纤维素酶。 课题目标 1.能简述纤维素酶的种类及作用。 2.掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物操作技术，了解这类微生物的应用。 1．纤维素 含________三种元素，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是________，人体内没有________，所以人体不能直接以纤维素为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成________释放到无机环境。 栏目链接 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 　 　 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 C、H、O　 葡萄糖 纤维素酶 葡萄糖 2.纤维素酶 纤维素 C1酶 Cx酶 纤维二糖 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素酶活性的测定实验： 图2-12 纤维素水解滤纸试验，右边的试管中加入了纤维素酶，而左边的没有加入。 （二）纤维素分解菌的筛选 1.方法： 刚果红染色法 通过________反应直接筛选。 颜色 刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过______________来筛选纤维素分解菌。 2.原理 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈 刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的 有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。 【典型例题】 量与活性 ① 有透明降解菌说明纤维素被纤维素酶催化降解，则降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关。降解圈越大，说明降解纤维素能力最强。 【方法点拨】 二、实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 〖旁栏思考1〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？ 尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上； 本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本相同。 土壤取样 〖旁栏思考2〗 取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？ 选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。 生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 〖旁栏思考3〗 将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。 将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。 1.目的： 增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 2.制备选择培养基 a.旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？ b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，是如何进行选择的？ c.你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用。 液体培养基，配方中无凝固剂琼脂。 有选择作用，碳源是纤维素，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。 选择培养 纤维素分解菌的选择培养基 纤维素粉 5g NaNO3 1g Na2HPO4·7H2O 0.5g KH2PO4 0.9g MgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5g 酵母膏 0.5g 水解酪素 0.5g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml 分析选择培养基配方，回答问题。 3.具体操作： 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 〖旁栏思考4〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 梯度稀释