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无菌实验操作
一.样品无菌实验流程
1. 将制备好的硫乙醇酸盐流体培养基、
胰酪大豆胨液体培养基、 氯化钠 -蛋白胨浸提液、
纯化水,与剪子、镊子、塞子、容器(浸提时用)一起放入灭菌锅进行灭菌。
2. 无菌室开启臭氧与空调,进行灭菌。
3. 将灭菌好的物品及集菌培养器、夹管套、样品等送入传递窗,准备灭菌。
4. 手消毒、工作台消毒。
5. 将集菌培养器放置在集菌仪上,待用。
6. 浸提液制备——将样品拆开放入容器中, 倒入氯化钠 -蛋白胨溶液直至完全淹没样品,
用镊子取出样品,浸提液备用。
7. 将三联集菌培养器一根导管夹住,该组为阴性对照(一组样品,一组阳性对照,一
组阴性对照)。
8. 开启集菌仪,将浸提液过滤到集菌培养器中。再用纯化水冲洗冲洗一遍。
9. 打开阴性对照组的导管夹子,并将集菌培养器底部用塞子塞住,再过滤培养基。
10. 将导管线剪短,导管将集菌培养器器密封住,进行标记(批号、名称、培养基)
。
11. 处理工作台。注意事项:
1. 浸提液、纯化水过滤时,首先盖住集菌培养器盖帽,再过滤,到集菌培养器的最上方刻
度线时,停止过滤,取下盖帽。
2. 培养基过滤至集菌培养器上方第三刻度线左右即可。
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