3谷氨酸发酵菌总结.ppt

选育细胞膜渗透性好的突变株 ? 抗 VP 类衍生物 ? 选育对溶菌酶敏感突变株 ? 选育二氨基庚二酸缺陷突变株 ? 选育温度敏感突变株 磷脂质 磷酸甘油 磷酸二羟丙酮 3- 磷酸甘油醛 脂肪酸 乙酰 CoA 柠檬酸 酮戊二酸 L-GA 葡萄糖 C 16 酸 C 18 酸 乙酸 葡萄糖 表活剂 生物素 n- 石蜡 油酸 油酸 － G 途径 石蜡途径 甘油缺陷部位 表活剂拮抗部位 细菌谷氨酸排泄控制部位 L-GA R 1 － C － O － CH 2 R 2 － C － O － CH ＝ O ＝ O H 2 C － O － P － O － R 3 O ＝ － O 脂肪酸 甘油 磷 酸 R1 和 R2 ： 烃 基 R3 ： 乙醇胺 丝氨酸 肌苷酸 胆 碱 磷脂 ? 生物素：是脂肪合成中关键酶—乙酰 CoA 羧化酶的辅助因子，生物素限量时，就会 抑制脂肪酸的合成，从而导致膜结构的不 完整。 ? 青霉素 诱变育种的基本过程： 选择选择合适的出发菌株 ↓ 制备待处理的菌悬液 ↓ 诱变处理 ↓ 筛选 ↓ 保藏和扩大试验 ? 出发菌株： ? (1) 要有一定的目标产物的生产能力 ? (2) 对诱变剂敏感 ? (3) 生产性能好，如生长快、营养要求低、 产孢子多且早，最好是生产上自然选育 的菌株。 举例： ? 根据代谢工程的基本原理 , 对谷氨酸棒杆菌 (Corynebacterium glutamicum)TWQ080 进行逐级诱变处理 , 最终选育出一株谷氨酸产生菌 GW46-4 。然后对其摇瓶发酵条件及 7L 罐发酵条件进行了优化 , 最后又对 出发菌株和突变菌株的代谢流量进行了分析。主要研究内容和结论如 下： (1) 以本实验室保藏菌株谷氨酸棒杆菌 TWQ080 为出发菌株 , 经过紫 外线 (UV) 和硫酸二乙酯 (DES) 逐级诱变处理 , 以高浓度糖、高浓度味精 和琥珀酸为唯一碳源的平板进行定向筛选 , 最终选育出一株谷氨酸产生 菌 GW46 。然后对该菌株进行了耐高温驯化 , 驯化过程中不断提高培养温 度 , 经过多次驯化 , 育得一耐高温菌株 GW46-4, 在未经优化的条件下产酸 92.5g/L, 比出发菌株提高了 31.2% 。 (2) 对菌株 GW46-4 的种子培养基及培 养条件进行了优化 , 发现最佳种子培养基配方：葡萄糖 25g/L 、玉米浆 30g/L 、磷酸氢二钾 1.5g/L 、尿素 6g/L 、硫酸镁 0.4g/L ；最佳培养条件： 初始 pH 7.0, 装液量 30mL/250mL 。 ? 代谢途径分析 ? 策略 2 代谢控制育种策略 氨基酸发酵工艺学 3 谷氨酸生产菌的特征、育 种及扩大培养 关键词提示 ? 菌落形态、菌体形态 ? 重要生理特征 ? 育种策略 ? 谷氨酸生产菌种制备 第一节 谷氨酸生产菌 ? 棒状杆菌科 (Corynebacteriaceae) 棒杆菌属 北京棒杆菌 C. pekinense Corynebacterium 钝齿棒杆菌 C. crenatum 谷氨酸棒杆菌 C. glutamicum 百合棒杆菌 C. lilium 美棒杆菌 C. callunae 力士棒杆菌 C. herculis 小杆菌属 嗜氨小杆菌 Microbacterium ammoniaphilum Microbacterium 节杆菌属 球形节杆菌 Arthrobacter globiformis Arthrobacter ? 短杆菌科 (Brevibacteriaceae) 短杆菌属 乳糖发酵短杆菌 B. lactofermentum Brevibacterium 叉开短杆菌 B. divaricatum