缺镁金盏菊幼苗生理生化指标影响的研究.docxVIP

--------------------------------------------------------------- 最新资料推荐 ------------------------------------------------------ 缺镁金盏菊幼苗生理生化指标影响的研究 缺镁对金盏菊幼苗生理生化指标影响的研究 摘要： 本实验通过对金盏菊幼苗进行缺镁元素培养， 观察其在完全培 养液浇灌下生长状况和缺镁培养表现得症状， 及测定植物细胞膜透 性、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性和生长指标的测定， 以 此研究镁元素对金盏菊生长的影响。 实验结果表明在镁缺营养液培养下金盏菊片的细胞质膜相对透 性减弱， 丙二醛（ MDA）含量显著增加， 产生的活性氧物质诱导超 氧化物歧化酶 （SOD）和过氧化物酶 （POD）活性活性下降。 关键词： 金盏菊幼苗、 缺镁元素培养、 缺素症状、 指标测定 金 盏菊又名金盏花， 为菊科金盏菊属植物。 金盏菊株高 30 ～60cm，为二年生草本植物， 全株被白色茸毛。 单叶互生， 椭圆形或椭圆状倒卵形， 全缘， 基生叶有柄， 上 部叶基抱茎。 头状花序单生茎顶， 形大， 4-6cm ， 舌状花一轮， 或多轮平展， 金黄或桔黄色， 筒状花， 黄色或褐色。 也有重瓣（实为舌状花多层） 、卷瓣和绿心、 深紫色花心等栽培品种。 常用于花坛摆花。 现利用土培法， 对金盏菊幼苗进行缺镁培养， 来探究金盏菊的 1/10 各种生理指标的变化的情况以及生长情况， 为金盏菊的栽培管理提 供科学依据。 材料与方法 1. 1 实验材料及器材： 金盏菊幼苗、 沙子、 TBA 、 TCA、 石英砂、 丙酮、 磷酸钾 缓冲液、 完全培养液、 电导仪、 温箱、 烧杯、 量筒、 分光光度 计、 离心机、 电子天平、 研钵、 移液管、 恒温水浴锅、 容量瓶、 冰箱等。 1. 2  实验方法： 在两个砂基中培养等量的金盏菊幼苗，相同的环境下进行一定时间的培养之后，  分别标上号 1、2，在对其进行缺素培养。 号砂基浇灌完全营养液作为对照组， 2 号砂基浇灌缺镁元素的营养液。 每隔两天浇一次营养液， 连续培养两周。 缺素培养两周后取两次样对其细胞质膜透性检测丙二醛（ MDA）含量测定、 过氧化物酶（POD） 活性的测定、 超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定、 各生理指标进行测定。 并测定植株株高、 叶长、 叶宽。 3植物生理指标的测量： ①植物细胞质膜透性的检测。 取实验组和对照组的金盏菊叶片， 洗净擦干， 分别量取 0. 3g；剪碎、 研磨、 过滤， 将三种滤液等量的装入小试管中， 增加一个等量蒸馏水的空白对照管， 先测常温下的电导率值， 再沸水加热 10 --------------------------------------------------------------- 最新资料推荐 ------------------------------------------------------ min 后测量电导率值。 ②金盏菊的丙二醛含量的测定。 取 0. 3g 的金盏菊叶片， 剪碎， 加入 10%三氯乙 酸（TCA） 2 ml 和少量 石英沙研 磨， 再加 8 ml TCA 湮没 后， 将浆液 以 4000r/min 离心 10min ， 取上清夜即样品提取液； 吸取 2 ml 提取 液到一试管， 对照管加 2 ml 蒸馏水， 各加入 2 ml0. 6%TBA 液， 混匀， 沸水浴 15 min ， 冷却， 以 4000r/min 离心 15min ， 取上 清夜测定 532nm 和 450nm 的 OD 值。 ③过氧化物酶 （POD）活性的测定。 取 1. 0g 金盏菊叶片， 加入预冷的 5ml20mmol/L KH2PO4, 研 磨取匀浆， 以 4000r/min 离心 15min ， 取上清夜并低温保存； 取 四只分光光度计比色杯 （光径 1cm） , 再其中一只加入 3ml 反应混 合液和 1mlKH2PO4作为对照， 另外 3 只分别加入 3ml 反应混合液和 1ml 上述酶液 , 马上记时， 测定 470nm 处的 OD 值， 每隔 1min 读数一次。 ④超氧化物歧化酶（ SOD） 活性的测定。 取 5 支试管 , 分别编号 (3 支测定管 ,2 支对照管 ) ， 按照表 2 的顺序加入试剂 (3 支测定管加酶液 , 2 支对照管加缓冲液），混匀后 将 1 支对照管置暗处， 其他各管于 4000lx 日光下反应 15min （要求各管受光情况一致， 温度高， 时间缩短， 低时延长）； 反应结 束后， 以不照光的对照管作空白进行调零，分别测定其他各管的 3/10 OD560