仪器分析技术 输液系统 高压输液系统.docVIP

高压输液系统 高效液相色谱仪的输液系统最基本的组成部件是高压输液泵和贮液罐，此外，根据仪器的配置和性能的不同，尚有在线过滤器、梯度混合装置和在线脱气装置，其核心部件是高压输液泵。 一、高压输液泵 HPLC利用高压输液泵输送流动相通过整个色谱系统，泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可靠性，高压输液泵应具备如下性能： 1、压力稳定，能连续工作，无脉冲； 2、流量调节准确，范围宽； 3、密封性能好、耐腐蚀、耐磨、维修方便等。 从工作原理来分，高压泵可分为恒流泵和恒压泵。恒流泵可分为注射泵和往复泵，主要优点是始终输送恒定流量的液体，与柱压力的大小和压力的变化无关，因此，保留值的重复性好，并且基线稳定，能满足高精度分析和梯度洗脱要求。 恒压泵能保持输出压力恒定，但其流量则随色谱系统阻力而变化，故保留时间的重视性差。 二、 贮液罐 贮液罐又称贮液瓶或贮液器，用于存贮流动相，其材质应耐腐蚀，一般为玻璃或塑料瓶，容积一般在0.5～2.0L，无色或棕色,如图1所示。棕色瓶可起到避光作用，盛放水溶液时可减缓菌类生长。 贮液瓶的放置位置应高于泵，以保持一定的输液静压差。在插入贮液瓶内的输液管路顶端连有不锈钢或玻璃制成的在线微孔(0. 45μm)滤头。 图1贮液瓶 三、梯度洗脱装置 HPLC有等度(isocratic)和梯度(gradient)两种洗脱方式。 梯度洗脱有两种实现方式：低压梯度（外梯度）和高压梯度（内梯度）。低压梯度是在常压下将两种或多种溶剂按一定比例输入泵前的比例阀中混合后，再用高压泵将流动相以一定的流量输出至色谱柱，如图1所示。高压梯度一般只用于二元梯度，即用两个高压泵分别按设定比例输送两种不同溶液至混合器，在高压状态下将两种溶液进行混合，然后以一定的流量输出，如图2所示。 图1 低压梯度洗脱（外梯度） 图2 高压梯度洗脱（内梯度） 四、脱气装置 HPLC的流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作；还会影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至无法检测；在梯度淋洗时会造成基线漂移或形成鬼峰。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、固定相反应使其降解；还能与某些溶剂（如甲醇、四氢呋喃）形成有紫外吸收的络合物，产生背景吸收；在荧光检测中，溶解氧在一定条件下还会引起荧光猝灭现象；在电化学检测中，氧的影响更大，所以需要脱气处理。常用的脱气方法有在线脱气法和离线脱气法。 1、在线脱气法 在线真空脱气装置可实现流动相在进入输液泵前的连续真空脱气，脱气效果优于其他方法，适用于多元溶剂系统，其结构示意图见图1。当溶剂流经管状半透膜时，溶剂中的气体可渗透出来而脱去。 图1 在线脱气示意图 2、离线脱气法 （1）抽真空脱气 用微型真空泵，降压至0.05～0.07MPa即可除去溶解的气体。使用真空泵连接抽滤瓶，如图2所示，可以一起完成过滤和脱气的双重任务，由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂的脱气。对于多元溶剂体系，每种溶剂应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变，但由于溶剂混合时会有气泡产生，故需续用以下方法再脱气。 图2抽真空脱气 （2）超声波振荡脱气 将欲脱气的流动相置于超声波清洗机中，如图3所示，用超声波振荡10～30min，即可。 图3超声清洗机 （3）吹氦脱气 使用在液体中比空气中溶解度低的氦气，以60mL/min的流速缓缓地通过流动相10～15min，除去溶于流动相中的气体。此法适用于所有的溶剂，脱气效果较好，但也会影响混合溶剂的比例。