苗药红花龙胆化学成分及抗肿瘤活性研究结题汇报.pptVIP

3 项目考核指标及完成情况 三、项目考核指标及完成情况 （一）考核指标 1、筛选分离出苗药红花龙胆的抗肿瘤生物活性化合物。 采用UPLC-Q-TOF-MS法分析苗药红花龙胆化学成分，分离鉴别了红花龙胆33个化学成分，并对有效部位及有效成分进行了抗肿瘤活性筛选。 2、在核心期刊上发表研究论文2篇。 标注基金号，在中文核心期刊上发表研究论文5篇。 4 经费使用情况 三、经费使用情况 5 存在问题与今后工作 自项目立项以来，项目组一直在积极开展工作，我们从红花龙胆有效物质基础、入血成分、有效部位药理作用、有效部位化学成分、有效部位抗肿瘤活性筛选等进行了大量研究，均取得了一定研究结果。标注基金号在中文核心期刊上发表论文5篇，在投文章2篇，超额完成了合同任务。 虽项目已按要求完成，但项目组仍将对苗药红花龙胆继续进一步开展研究。 五、存在问题与今后工作 * * * 苗药红花龙胆化学成分及抗肿瘤活性研究 起止年限： 2015年12月至2018年6月 目 录 项目研究背景与意义 1 2 3 经费使用情况 4 项目考核指标及完成情况 存在问题与今后工作 5 项目研究内容及完成情况 1 项目研究背景与意义 红花龙胆为龙胆科植物红花龙胆Gentiana rhodantha Franch.全草。具有清热燥湿，解毒泻火，止咳的功效。为贵州苗族习用药材。目前对其化学物质基础、生物活性等研究均不够深入。基于此，分离红花龙胆不同极性部位，并对其化合物进行结构鉴定。对萃取部位和单体化合物活性进行筛选，以期为寻找新型抗肿瘤先导化合物提供依据。 一、项目研究背景与意义 2 项目研究内容及完成情况 二、项目研究内容及完成情况 序号 合同规定 实际完成内容 完成评价 1 对苗药红花龙胆进行提取；选用不同的分离技术对粗提物进行化合物的分离纯化；根据光谱数据和化学性质，对分离到的化合物进行结构鉴定。 采用超高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS）对苗药红花龙胆95%乙醇提取物正丁醇部位的化学成分进行分析鉴定。从红花龙胆中共鉴定出化合物 33个， 包括环烯醚萜类10个， 酚酸类6个， 黄酮类5个，三萜类6个，苯甲酸碳苷类1个，吡喃酮类1个，其他类4个。其中24个化合物是首次报道。 完成 2 对分离到的化合物选择性地进行抗肿瘤生物活性筛选。 采用MTT 法对红花龙胆有效部位及主要有效成分药物对K562、PC3和WM9肿瘤细胞的抑制作用进行了研究。 完成 （1）苗药红花龙胆血清药物化学初步研究 建立了红花龙胆药材及其提取液灌胃后大鼠血清HPLC指纹图谱，通过色谱峰的相关性研究，确定了其入血移行成分，初步阐明了红花龙胆提取液在大鼠体内的主要药效物质基础。 （2）苗族药红花龙胆有效成分芒果苷在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性研究 半衰期和体外固有清除率均表明芒果苷代谢稳定性良好，且在不同种属之间无显著性差异。 3.超额完成部分 二、项目研究内容及完成情况 （3）UPLC-MS/MS-超滤法测定芒果苷与大鼠的蛋白结合率 采用超滤法结合已建立的UPLC-MS/MS法分别测定低、中、高三种浓度的芒果苷在大鼠血浆中的蛋白结合率，为其后期药效学药理学和临床研究提供依据。 （4）基于线粒体分裂融合研究芒果苷对NaF损伤SH-SY5Y细胞的保护作用 半衰期和体外固有清除率均表明芒果苷代谢稳定性良好，且在不同种属之间无显著性差异。 二、项目研究内容及完成情况 3.超额完成部分 （5）红花龙胆对肺炎链球菌肺炎的治疗作用 探讨苗药红花龙胆对肺炎链球菌感染性肺炎小鼠是否具有治疗作用，为进一步扩大民族医药红花龙胆的临床应用范围，提供实验依据。 二、项目研究内容及完成情况 3.超额完成部分 二、项目研究内容及完成情况 （1）UPLC-Q-TOF-MS法分析苗药红花龙胆化学成分 红花龙胆负模式总离子流图 红花龙胆正模式总离子流图 罗君,赵琳珺,包江平.UPLC-Q-TOF-MS分析苗族药红花龙胆化学成分[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(24):89-94. 通过设定合适的阈值参数，对红花龙胆正负离子模式下采集到的总离子流图进行提取，获得化合物的准离子分子峰（如[M+H]+，[M-H]-）信息，根据供试品的色谱保留时间、质谱准离子峰和碎片离子等信息。通过龙胆属相关文献以及对照品信息进行数据分析，得到红花龙胆33个化学成分，其中包括（裂）环烯醚萜类10个，酚酸类6个，黄酮类5个，三萜6个，苯甲酸碳苷类1个，吡喃酮类1个，其他类4个。 芒果苷裂解图（负） 芒果苷裂解图（正） 芒果苷对照品正模式（C）