2.4.3.2 DNA复制的其他酶.pdf

DNA复制的其它酶 LOGO DNA复制酶系 Ø拓扑异构酶 （解超螺旋酶 ） 作 用 Ø解链酶 （解双螺旋酶 ） 次 序 Ø单链DNA结合蛋白 Ø引物酶 ØDNA聚合酶 Ø连接酶 解旋解链酶 Ø 拓扑异构酶 （解超螺旋酶 ）：解开DNA超螺旋 Ø 解链酶 （解螺旋酶 ）：解开碱基对之间的氢键 ，形成两股单链 Ø 单链结合蛋白 ：结合于单股DNA链 ，阻止DNA复性 解旋解链酶 拓扑异构酶　消除复制过程中DNA双链因过分盘绕而产生的超螺旋结构 ，催化的反 应本质是先切断DNA的磷酸二酯键 ，改变DNA的连环数之后再连接之 ，兼备DNA 连接酶和DNA内切酶的功能。其断裂反应和连接反应是相互偶联的 ，不能连接事先 已经存在的断裂 DNA。其作用是既能水解又能重新连接磷酸二酯键 ，可分为 Ⅰ和 Ⅱ两种类型。 Ⅰ型　断开/连接一条DNA链 ，无需供能 Ⅱ型　断开/连接两条DNA链 ，消除正超螺旋时无须供能。但在引入负超螺旋时需 消耗ATP。 解旋解链酶 解螺旋酶(DnaB蛋白)　与DnaA (辨识复制起始点)和DnaC (辅助解螺旋酶在起始点 的结合)等协同作用 ，将包埋在双螺旋内部的碱基间氢键断开 ，使双链DNA解开成 单链而作为模板。 单链DNA结合蛋白SSB　维持模板处于单链状态并保护其完整。 引物酶 与解螺旋酶一道形成引发体与模板DNA结合并合成出RNA引物(10~60 nt) ◇ 引物只能是RNA而不是DNA ：DNA聚合酶没有催化两个游离dNTP聚合的能力 ， 而RNA聚合酶(包括引发酶) 能以DNA单链为模板催化游离NTP的聚合 ，由此形成 的短RNA引物即可提供3’-OH末端供dNTP加入以延长。 ◇ 前导链只需要合成一次RNA引物 ，滞后链则 需要合成多次。 ◇ 和DNA聚合酶相比 ，引发酶发生错配的可能性更大 ，但在完成引物功能后可随 即将其去除并代之以准确率更高的DNA片段 连接酶 在滞后链合成过程中 ，将不连续的DNA子链连接 DNA连接酶 核糖 腺嘌呤 DNA聚合酶的 腺苷酰化 AMP 的替换封闭缺口 切口处5‘-磷 酸的活化 AMP-DNA DNA上的缺口 缺口封闭