凝胶层析法的基本原理.pdfVIP

1. 凝胶层析法的基本原理？ 答：层析须在两相系统间进行。一相是固定相，需支持物，是固体或液体。另一相为 流动相，是液体或气体。当流动相流经固定相时，被分离物质在两相间的分配，由平 衡状态到失去平衡到又恢复平衡，即不断经历吸附和解吸的过程。 2. 凝胶层析法常用凝胶的种类和特点？ 聚丙烯酰胺凝胶 　　是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位， 由交联成的， 凝胶色谱法 经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝 胶。交联剂越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶－P （Bio-Gel P），由 tosoh 的 TSKGEL 的 pw 系列，适合蛋白和多糖的纯化。 交联葡聚糖凝胶 　　⑴Sephadex G 交联葡聚糖的商品名为 Sephadex，不同规格型号的葡聚 糖用英文字母 G 表示，G 后面的数为凝胶得水值的 10 倍。例如，G-25 为每 克凝胶膨胀时吸水 2.5 克，同样 G-200 克每克干胶吸水 20 克。交联葡聚糖 凝胶的种类有 G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和 G-200。 因此， “G”反映，凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。 　　⑵，是─Sephadex G-25 的羧丙基衍生物， 能溶于水及亲脂溶剂，用于 分离不溶于水的物质。 琼脂糖凝胶 商品名很多，常见的有，Sepharose （，pharmacia ）， 凝胶色谱法 Bio-Gel-A （美国Bio-Rad）等。琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢 键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它 的结构是稳定的，可以在许多条件下使用（如水，pH4-9 范围内的盐溶液）。 琼脂糖凝胶在 40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。 聚苯乙烯凝胶 商品为 Styrogel ， 具有大网孔结构， 可用于分离分子量 1600到 40，000， 000 的生物大分子，适用于有机多聚物，分子量测定和脂溶性天然物的分级， 凝胶机械强度好，洗脱剂可用甲基亚砜。 3. 不同性质的物料（热敏性、高粘度、易结垢或易析出晶体、发泡性、腐蚀性） 如何蒸发浓缩设备？ 答：（一）循环型蒸发器 特点：溶液在蒸发器中循环流动，因而可以提高传热效果。由于引起循环 运动的原因不同。有分为自然循环型和强制循环型两类。 自然循环：由于溶液受热程度不同产生密度差引起 强制循环：用泵迫使溶液沿一定方向流动 1.中央循环管式蒸发器 中央循环管式蒸发器为最常见的蒸发器，其结构如图5-2 所示， 它主要由加热室、蒸发室、中央循环管和除沫器组成。蒸发器的加 热器由垂直管束构成，管束中央有一根直径较大的管子，称为中央 循环管，其截面积一般为管束总截面积的 40%～100%。当加热蒸汽 （介质）在管间冷凝放热时，由于加热管束内单位体积溶液的受热 面积远大于中央循环管内溶液的受热面积，因此，管束中溶液的相 对汽化率就大于中央循环管的汽化率，所以管束中的气液混合物的 图5-2 中央循环管式蒸发器 密度远小于中央循环管内气液混合物的密度。这样造成了混合液 在管束中向上，在中央循环管向下的自然循环流动。混合液的循环速度与密度差 和管长有关。密度差越大，加热管越长，循环速度越大。但这类蒸发器受总高限 制，通常加热管为 1～2m，直径为 25～75mm，长径比为 20～40。 优点：溶液循环好；传热效率高；结构紧凑、制造方便、操作可靠。 缺点：循环速度低；溶液粘度大、沸点高；不易清洗。 适于处理结垢不严重、腐蚀性小的溶液。 2.悬筐式蒸发器 悬筐式蒸发器是中央循环管蒸发器的改进。其加热室像个悬筐，悬 挂在蒸发器壳体的下部，可由顶部取出，便于清洗与更换。加热介质由 中央蒸汽管进入加热室，而在加热室外壁与蒸发器壳体的内壁之间有环 隙通道，其作用类似于中央循环管。操作时，溶液沿环隙下降而沿加热管 上升，形成自然循环。一般环隙截面积约为加热管总面积的 100～150%，因 5-3 悬筐式蒸发器 图5-4 外热式蒸发器 而溶液循环速度较高(约为 1～1.5m/s)。由于与蒸发器外壳接触的是温度较低