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子情境:引导文
培养基及其制备
第二章 培养基及其制备
教学目标:
了解:微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物;培养基的组成
一般掌握:培养基的类型;糖蜜原料及预处理
重点掌握:工业培养基的选择与配制原则;淀粉制备葡萄糖的工艺技术
第一节 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物
微生物营养物质的确定主要依据微生物细胞及其代谢产物的化学组成。
一、微生物细胞的化学组成
细胞化学成分 水(70%-90%)
干物质 有机物(蛋白质、多糖、脂、核酸——占干重96%
维生素、有机酸及它们的降解物)
无机物(盐)
细胞含水量=(湿重-干重)/湿重×100%
细胞化学元素 主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫(占细胞干重97%)、
钾、镁、钙、铁;
微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等
细胞的化学成分的作用为:遗传连续性、通透性和生化活性。
注:微生物细胞的化学组成不是绝对不变的,往往与菌龄、培养条件、环境及生理特性相关。
二、微生物胞外代谢产物
微生物的生长过程中,除了利用外源营养物质合成新细胞外,还会产生一些有机化合物并将其分泌到微生物细胞外。
微生物胞外代谢产物主要包括四个部分:
1、代谢副产物
伴随正常代谢作用所产生的一些小分子化合物,包括气体(CO2、H2、CH4)和乙醇、丙酮、丁醇、丙酸、乳酸等低分子质量的醇类、酮类和脂肪酸类。
2、中间代谢产物
在代谢途径中产生的一些小分子物质,如氨基酸、核苷酸、有机酸和单糖的衍生物,主要用于合成蛋白质,核酸、类脂和多糖等细胞物质。一般不分泌到微生物细胞外,只有在微生物细胞生物合成受阻或外源碳源浓度较高的情况下,才会大量积累和分泌于细胞外。
3、次级代谢产物
初级代谢:是指微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢,生成维持生命活动所需要的物质和能量的过程。这一过程的产物,如糖、氨基酸、脂肪酸、核苷酸以及由这些化合物聚合而成的高分子化合物,如多糖、蛋白质、脂类和核酸等。
由于
次级代谢:次级代谢是指微生物生长到一定时期,以初级代谢产物为前体物质,合成一些对微生物的生命活动无明显功能的物质的过程,这一过程的产物即次级代谢产物。次级代谢产物大多是一类分子结构比价复杂的含有苯环的化合物,如抗生素、激素、毒素、色素等。
次级代谢产物由微生物细胞合成,既不参与细胞的组成,又不是酶的活性基团,也不是细胞的贮存物质。次级代谢产物种类很多,通常有抗生素、激素、毒素、色素等。分泌于微生物细胞外。
4、胞外水解酶类
淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、葡萄糖糖化酶、葡萄糖异构酶等。
第二节 培养基组成
培养基是人工配制的供微生物生长、繁殖、代谢,产生人们所需产物的营养物质和原料。同时,培养基还应提供微生物生长所必需的环境条件,如一定的pH。培养基的组成和配比是否恰当对微生物的生长、产物的形成、提取工艺的选择、产品的质量和产量都有很大的影响。组成培养基的原材料主要有:碳源、氮源、无机盐、微量元素、生长因子、前体物质和水。
一、碳源【糖类、脂肪、有机酸、烃和醇类】
含量:在微生物细胞内的含量高,可占细胞干物质的50%左右。
功能:提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础;
1、糖类:单糖、双糖、淀粉质类(淀粉及其水解液是发酵常用碳源)和糖蜜等。
⑴淀粉:水解为单糖几乎被所有微生物利用,广泛用于抗生素、氨基酸、有机酸、多糖、甾体等发酵产品的生产中。
⑵糖蜜:是甘蔗或甜菜糖厂的一种副产物,含有相当数量的可发酵性糖,是发酵工业的良好原料。
2、脂肪:霉菌和放线菌利用,脂肪可分解为甘油和脂肪酸,充足的氧后会生成CO2和H2。常用的油脂有豆油、菜油、棉籽油、葵花籽油、猪油、鱼油、玉米油、亚麻籽油等。
3、有机酸
如乳酸、柠檬酸、延胡索酸、高级脂肪酸等或它们的盐,可用于单细胞蛋白、氨基酸、维生素、麦角碱和某些抗生素的发酵中。有机酸或有机酸盐被利用后,会使发酵液的pH上升。
4、烃和醇类
正烷烃(石油裂解中得到的14-18碳的直链烷烃混合物)作为碳源,在单细胞蛋白、氨基酸、有机酸、维生素、酶类、多糖类及某些抗生素发酵中均获得较好的效果。
用乙醇生产单细胞蛋白。
二、氮源【无机氮源:氨水、硫酸铵、尿素、硝酸钠;有机氮源:豆饼粉、麦麸、玉米浆、蛋白胨;发酵菌丝体、酒糟】:
功能:构成菌体和代谢产物,硝化细菌的能源物质
1、有机氮源
花生饼粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体、毛发水
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