基于分子生物学视角的STIL基因结构研究.docxVIP

基于分子生物学视角的STIL基因结构研究    　　摘要：STIL基因是从急性T淋巴细胞白血病基因中克隆而来, 作为一种癌基因, STIL与生物体内中心体的生成、复制及细胞有丝分裂密切相关。中心粒是细胞分裂的控制中心。STIL与PLK4 (一种中心粒复制相关蛋白) 在细胞分裂的G1期中期组成包含有卷曲螺旋结构域 (coiled-coil domain, CCD) 和STAN模体 (STAN motif) 的复合体参与中心粒的形成、复制, 调控细胞有丝分裂, 并且生成中心体的数量与STIL蛋白含量成正比。进一步的研究发现, 在神经系统中STIL截断突变基因 (STILT) 通过影响中心粒的增殖从而导致小头畸形症 (MCPH) 的发生, 并与全前脑畸形 (HPE) 的发病有关。增强STIL介导的Shh信号转导通路可以降低视网膜多巴胺能细胞对神经毒素的敏感性, 从而保护视网膜。经研究发现, STIL在多种肿瘤组织均有表达, 并通过调节中心体的结构和数目, 影响染色体不稳定性形成参与恶性肿瘤发生、发展及转移。在肺癌特别是非小细胞肺癌中STIL呈过表达状态。在胰腺癌中, STIL在Hedgehog信号通路中通过与SUFU (融合抑制蛋白) 和Gli (一种锌指蛋白) 相互作用导致胰腺癌的发生。本篇综述旨在探讨STIL在中心粒复制和细胞增殖方面的作用, 揭示其与神经系统疾病及恶性肿瘤发生的关系及潜在机制, 为疾病的预后和治疗提供新的方向。 　　关键词：STIL; 中心粒; 增殖; 恶性肿瘤;分子生物学  　　STIL (SCL/TAL1 interrupting locus) 基因是从人类急性T淋巴细胞白血病相关染色体重排中克隆而来的, 作为一种癌基因, STIL的进化高度保守。STIL与生物体内中心体的生成、复制及细胞有丝分裂密切相关。中心体作为一种重要的细胞器, 是细胞分裂时的控制中心, 若中心体复制异常, 则会影响细胞正常的有丝分裂, 使得染色体分配不均, 导致非整倍体细胞的出现, 这是许多神经系统疾病及恶性肿瘤的发病基础。STIL作为中心粒的调控因子及其在Hedgehog和Shh信号通路中的作用与多种疾病的发生发展密切相关。本文主要对STIL的分子生物学特性及其在神经系统疾病和恶性肿瘤中的作用机制进行综述。 　　1 STIL基因的结构与功能 　　STIL基因 (又称SIL基因, SCL/TAL1 interrupting locus) 最初是从急性T淋巴细胞白血病的染色体重排中克隆而来的, 定位于1p32, 其逆转录产物c DNA由3681 bp组成, 编码一个包含1 287个氨基酸序列的开放阅读框架, 相对分子质量为143 000[1]。STIL/SCL基因的重排使得STIL内显子1和SCL内显子1相并列, 形成融合的STIL/SCL mRNA (STIL外显子1以头尾相接的形式连接SCL外显子3) 。STIL启动子调控造血转录因子SCL的表达, 使SCL基因表达异常并导致了白血病的发生[2]。 　　中心粒是中心体和初级纤毛的重要结构, 为圆柱状的九倍体结构, 其复制是一项严格调控的过程, 在纤毛中它们以自身的九组微管为模板进行复制, 前中心粒垂直连接在母中心粒上, 构成了中心体的核心结构[3]。目前为止, 仅确认包括SPD2/CEP192、ZYG1/SAK/PLK4、SAS4/CPAP、SAS6和SAS5/ANA2/STIL在内的几种进化保守的蛋白在低级生物果蝇、线虫和人类的中心粒复制中起作用。通过siRNA和免疫电镜检查显示人类细胞中心粒的模式化复制是通过激活PLK4 (一种中心粒复制相关蛋白) 的活性以及将CEP152聚集到亲代中心粒表面来进行的。STIL和SAS6聚集到新生成的前中心粒的底部, 并与来自中心粒轮状结构的CEP135相互作用。CACP随后参与中心粒外部9个三联体微管的组成, 并在PLK4的帮助下介导中心粒的扩增。PLK4在G1期中期与STIL结合并对其进行磷酸化, 形成PLK4-STIL复合体后对中心粒复制进行调控, 该复合体包含卷曲螺旋结构域 (coiled-coil domain, CCD) 和STAN模体 (STAN motif) [4-6]。CCD是中心体蛋白中普遍存在的一种结构[7]。近来的研究显示[5], STIL蛋白中的CCD介导了PLK4-STIL复合体的形成, 并使得PLK4的激活成为了中心粒复制的重要起始步骤。David A等[8]通过实验发现了参与低聚反应、中心体定位以及STIL蛋白相互作用的特定CCD蛋白残基。将此结构分为2个部分, 其中包括一个含有8个疏水基的残基, 主要参与螺旋结构之间的低聚反应, 该反