3. 酶促反应动力学1（精简）.pdf

酶促反应动力学 酶促反应动力学 研究酶促反应速度以及各种因素对酶促反应 速度影响机制的科学 影响因素 酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、 激活剂等 研究某一种因素的影响时，维持其余各因素恒定 一、底物浓度对反应速率影响 作图呈矩形双曲线 在其他因素不变的 情况下，底物浓度对 反应速率的影响呈矩 形双曲线关系  当底物浓度较低时 反应速率与底物浓度成正比，反应为一级反应  随着底物浓度的增高 反应速率不再成正比例加速，反应为混合级反应 当底物浓度高达一定程度 反应速率不再增加，达最大速率，反应为零级反应 前提条件 ★ 单底物、单产物的反应 ★ 酶促反应速率一般在规定的反应条件下，用单 位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 ★ 反应速率取其初速率，即底物的消耗量很小 （一般在5 ﹪以内）时的反应速率 ★ 底物浓度远远大于酶浓度 （一）米－曼氏方程式 揭示单底物反应的动力学特性  解释酶促反应中底物浓度和反应速率关系的 最合理学说是酶-底物中间复合物学说： 中间产物 k 1 k E + S ES 3 E + P k 2 快速平衡反应 慢反应  1913年Michaelis 和Menten 提出反应速率与底物 浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简 称米氏方程(Michaelis equation) V [S] max V ＝ Km + [S] [S]:底物浓度 V:不同[S]时的反应速率 V :最大反应速率 max (maximum velocity) Km :米氏常数 (Michaelis constant) （二）K 与V 是重要的酶促反应动力学参数 m m 1、Km是酶的一个重要的特征常数  Km值等于酶促反应速率为最大反应速率一半 时的底物浓度 V V [S] max max = 2 Km + [S] Km = [S] Km值的单位是底物浓度单位，如mol/L 2、Km在一定条件下可表示酶对底物的亲和力 Km越大，表示酶对底物的亲和力越小 Km越小，酶对底物的亲和力越大 3、Km值可以判断酶的专一性和天然底物 -6 -2 不同的酶具有不同Km值，多在10 ~10 mol/L 的范围 酶对每个作用底物都有Km值。当酶有几种不同底物存 在时，Km值最小的为最适底物或天然底物 同一种酶与相同的底物作用时，作用条件不同时Km值 也不同，Km值最小的是酶反应的最适反应条件 Km 可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度，当 [S]=10Km 时，ν 91%Vmax，此时即为最合适的测定酶 活性所需的底物浓度 判断反应的方向或趋势 4 ．Vm是酶被底物完全饱和时的反应速率