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病理技术员在分子病理领域的作用 浙江大学附属第一医院病理科丁伟 分子病理目前可以分三类：1、建立在形态学基础上的（比如 her2荧光原位杂交、显色原位杂交等）检测；2、建立在PCR平台 上的（比如测序、荧光定量PCR等）数据检测；3、检测数据用于 病理诊断的（比如软组织肿瘤、淋巴瘤等肿瘤的荧光原位杂交技术 或PCR技术）。 分子基因检测的归属争议很大:，是在病理科做？还是在检验科 做？药剂科以及各种实验室做？大家都在抢，为什么？因为大家看 到了利益，看到了学科的发展。那么，病理与其他学科相比优势在 那里：1、样木的评估？ 2、有执业医生资格？很多病理医生都这么 认为，其实这些其他学科都可能做到，检验有医师、临床药理也有 医师，他们可以通过学习培训，识别肿瘤细胞，懂得初级的病理诊 断并不是难事，而且我们的检验分子实验室连病理医师都有。如何 争回来？ 我们病理的真正优势是什么？风险意识和风险控制！由于血液 检查每次送检的样木不一样，那怕某次的结果是错误的，也没有办 法溯源，检验人员可以告诉患者基因发生了改变：上次检查血内还 没有出现或现在血液内不存在了。所以检验的检查风险很小，风险 意识不强。这种习惯性思维和工作方法运用到组织分子病理检测 时，就会出现危机：病理样本和血液样木不一样，病理样木具有朔 源性：患者因为治疗效果不好或者其他原因到其他医院治疗时，往 往会拿原来的组织到别的医院重新进行基因检测，如果两次检测结 果不一致，如果两次检测结果不一致，患者就可以告你耽误他的了 治疗。任何一次操作的失误，设备的误差，以及试剂种类不同、品 牌不同、实验方法不同，都可能导致结果的不同。这种风险还存于 样本采取的过程（切白片）：这个过程充满了陷阱。由于病理样木 是在病理科的，这个工作只有在病理科完成。这就有了检测前样本 评估，我可以给你肿瘤细胞多的组织，也可以给你只有少数肿瘤大 片坏死的组织。作为患者和检测单位根木不清楚你给的是那块，就 是给错了你也不知道。切白片还会引发污染：我们往往给外单位切 白片时，都是在切常规切片时切的，切片台上、毛笔都是蜡屑，展 片水也不会很干净，还有切片刀、银子，这些都不可能不存在污 染。在常规病理切片时也经常会有污染，大多在显微镜下能够分辨 出来；当与病史不符合时会重切，才避免了误诊，但也有少量的污 染因为天衣无缝，也会产生误诊。如果病理科不开展基因检测（只 是外送），不可能有专人负责这个工作，也不会有人去参加过专业 培训，更不要说为别人考虑风险意识。现在基因检测有敏感度大多 在1-2%以上，很小的污染就可能影响结果。那规范的分子取样应该 怎么做？专人负责，专人操作，专用机器：1、切片之前（每操作 一个蜡块），必须使用消毒酒精擦拭切片机，清除残余蜡屑。2、用 一次性棉签代替毛笔，一次性刀片一个蜡块一个刀口。3、用一次性 药盒作展片工具，每个蜡块一只。蹑子用完后也要用消毒酒精擦 拭。除了试剂质量和操作流程以外，仍会有很多无法估量的因素造 成分子病理的假阳性或假阴性。随着患者法律意识和各种医学知识 的增强，分子检测迟早会变成烫手的山芋，回归到病理科。 作为一个病理技术员，必须要做好室内质控和室间质控。应该 参加欧盟EMQN、CAP和卫计委病理质控中心PQCC的室间质评。 室间质控可以证明你用的方法是合理的、使用的试剂的合格的，操 作流程是正确的。室内质控：1、建立科学的SOP文件。2、严格按 规范操作。3、认真做好阳性对照。只有这样，才能做出稳定、正确 的结果。但这几句话做起来不难，难的是坚持。坚持靠什么？严格 的监督机制和责任心。现实的问题：我们以前有关分子病理检测规 范在制定时存在一定程度上的不合理性。我们规定必须是病理执业 医生才有资格签发报告，如果是建立在形态学基础上需要对疾病进 行诊断的，是正确的。如果是建立在PCR平台基础上仅仅是对数据 的报告那就有很大的问题了：做的人、判读的人和最终签发报告的 人常常不是同一个人。试想一下，如果一个病理科：所有的病理医 生都没有权力发报告，只有科主任才能签字，结果会是什么样子？ 签发报告给予了报告人的荣誉感、责任心，更重要的是必须承担风 险。事实上分子病理检测无论是基于组织学基础的（FISH）还是建 立在PCR平台上的，大多数单位都是由技术员操作，有的甚至连选 择样本也是技术员完成的。那如果都是由技术员操作、判读，医生 签字，医生其实存在很大的风险，出了问题，由谁负责？ 在中国，病理界认为病理医生严重缺少，个人认为并不十分准 确。在发达国家，病理医生与技术员的比例是1： 3左右，而中国连 1： 1还不到，如果说中国的病理医生缺少的话，那中国的技术员更 缺少，我们的病理医生可以把一部分工作分担出去。比如取材：中 国病理规范规定取材必须由有执业医生资格的病理医生取。但美