4.2 抗原制备生物化学.pdf

第四章 单克隆抗体 第二节 抗原制备 在其中的免疫学原理中，用抗原去刺激免疫系统，就能诱导机体 B 细胞增殖 并产生抗体。那么，抗原是什么呢？如何制备呢？ 抗原就是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答、并能与相应免 疫应答产物（即抗体和致敏淋巴细胞）在体内外发生特异性结合的物质，所以， 抗原有两个特性，一是刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的能力，叫免疫原性。 另一个是指能够与其所诱生的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合的能力 ，叫反应 原性。因此，完全抗原就是指那些同时具有免疫原性和反应原性的物质。而半抗 原指那些只具有反应原性而无免疫原性的物质。半抗原通过与载体偶联可以制成 完全抗原。 这是一个半抗原偶联载体制备完全抗原的例子 （图1）。1,3-二硝基苯是一个 半抗原，将它直接免疫小鼠，由于它没有免疫原性所以小鼠不产生抗体。但是将 它偶联到蛋白载体后再免疫小鼠时，小鼠就会产生同时针对二硝基苯和载体蛋白 的抗体，这就是因为，半抗原二硝基苯与载体偶联后变成了完全抗原了。 图 1 一个半抗原偶联载体制备 还有一个跟抗原相关的概念叫表位，表位就是指存在于抗原表面的，决定抗 原特异性的具有特殊性结构的化学基团，也称抗原决定簇。表位有分构象表位和 线性表位，构象表位是指由蛋白质肽链不连续的氨基酸残基在空间上靠近而形成 的表位，线性表位则是指由一段连续的肽链氨基酸残基构成的表位。蛋白质变性 后构象表位消失，而线性表位继续存在。 图2 构象表位和线性表位 下面我们介绍一下完全抗原的主要种类，常见的完全抗原有细菌、病毒和 蛋白质等。图 3 中所展示的就是两种细菌，大肠杆菌和链球菌，都是完全抗原。 图 3 细菌完全抗原 病毒也是完全抗原 （图4），比如我们所熟知流感病毒、以及我们不熟知的埃 博拉病毒等都是完全抗原。 图4 病毒完全抗原 大部分蛋白质都是完全抗原 （图5），蛋白质如果分子太小则需要通过与载体 偶联，或自身偶联形成多聚体才能成为完全抗原。 图 5 蛋白质完全抗原 如果我们要制备完全抗原的单抗要注意些什么呢？首先是免疫抗原的选择， 我们要选择那些纯度高，浓度适当，最好具有天然构象的完全抗原作为免疫抗原。 其次就是检测抗原的选择，我们除了要考虑抗原纯度外，还要依据所需目标单抗 的用途和特异性来权衡选择检测抗原。 半抗原主要是一些小分子抗原，比如小分子毒素、毒品、激素和抗生素药物 等都是半抗原。下面我们简单为大家介绍一下。 最为大家所熟知一种食源性毒素就是黄曲霉毒素 （图6），它主要由食品霉变 过程中的一些霉菌所产生，具有强烈的致癌性，是食品安全检测中重点关注的对 象，目前市场已有多种黄曲霉毒素的单抗和免疫学检测产品上市，可以很方便的 对黄曲霉毒素进行检测。