三亲接合转化法转化蓝藻.pdf

三亲接合法转化蓝藻 1 实验背景 蓝藻，在国际上称为蓝细菌，因为它具有原核微生物的结构特点和真核植物的 光合特点是最古老的、最早进行光合放氧的原核生物 古代 现代 它的出现改变了 联合国推荐蓝藻中 的螺旋藻是21世纪 地球大气还原态 最理想的食物 在生物中它的基因 氧气的增加促进 组最小，遗传系统 了生物界的进化 简单，所以转基因 技术发展较成熟 综上，蓝藻的转化方法是值得学习的 1 实验背景蓝藻是单细胞生物，生物体形态有4种： 单细胞、丝状体、有异形胞的丝状体和分支 丝状体 单细胞 异形胞丝状体 丝状体 分支丝状体 1 实验背景 蓝藻生物 三亲接合 自然转化 转化方式 转化法 转化 效率 较高 单细胞蓝藻 异形胞 （天然感受态） 丝状体蓝藻 1 实验背景 E.coli donor1 接合 三亲接合转化法示意图 质粒 转移基因 E.coli donor 2 蓝藻细胞 辅助 运载 运载 质粒 质粒 质粒 mo Bo b m 目的基因 2 实验设计 接合质粒 运载和辅 的大肠杆 助质粒的 菌 大肠杆菌 藻菌混合 涂平板 （1：10） 抗生素筛选 受体蓝藻细胞 操作核心：3种细胞和3种质粒的准备 2 实验设计 温度 光强 pH 振荡转速 BG