试剂和培养基配方.docVIP

附录A试剂和培养基配方 稀释液 木规范屮的稀释液包括：胰蛋白豚生理盐水溶液（TPS）、磷酸盐缓冲液（PBS, 0. 03mol/L, pH7.2）、中和剂溶液、标准硬水（硬度342mg/L）、生理盐水 等 1.1胰蛋白腺生理盐水溶液（TPS） 胰蛋白豚l.Og 氯化钠8. 5g 先用900mL以上蒸憎水溶解，并调节pll值在7.0±0.2 （20°C）,最终用蒸催水加至 lOOOmL,分装后，经121°C压力蒸汽火菌后使用。 1? 2 磷酸盐缓冲液（PBS, 0. 03mol/L, pH7.2） 无水磷酸氢二钠2. 83g 磷酸二氢钾1. 36g 蒸憎水加至lOOOmL 将各成分加入到lOOOmL蒸催水屮，待完全溶解后，调pH至7. 2,于121°C压力蒸气 火菌20min备用。 1.3标准硬水（硬度342mg/L） 氯化钙（CaCl2） 氯化镁（MgCl2?6H2O） 蒸馆水加至lOOOmL 0. 304g 0. 139g 将备成分加入到lOOOmL蒸憎水中，待完全溶解后，于12PC压力蒸气灭菌20min备用。 1.4生理盐水 氯化钠 蒸IS水加至 8. 5g lOOOmL 将氯化钠加入到lOOOmL蒸馅水屮，待完全溶解示，于121°C压力蒸气灭菌20min备用。 革兰染色液 笫1液：结晶紫溶液 结晶紫乙醉饱和溶液 100ml, 结晶紫4g?8g 95% 乙醉 100mL 1%草酸胺溶液 第2液：卢戈硕液 碘化钾2g 碘lg 蒸憎水 200mL 第3液：脱色剂 （1） 95%乙醇 （2）丙酮乙醇溶液 lOOmL 95%乙醉 70mL 丙酮 30mL 第4液：稀释石炭酸复红液 碱性复红乙醇饱和溶液 10mL 碱性复红5g~10g 5%石炭酸溶液 90mL 蒸憎水 900ml, 孔雀绿与沙黄芽抱染色液 第1液5. 00%孔雀绿水溶液 笫2液0. 5%沙黄水溶液 有机干扰物 牛血清白蛋白30g或3g 蒸饱水 lOOOmL 溶解后用微孔滤膜（孔径为0.45pm）滤过除菌，冰箱保存备用 营养琼脂培养基 蛋白腺10g 牛肉膏5g 氯化钠5g 琼脂15g 蒸馆水 lOOOmL 除琼脂外其他成份溶解于蒸镭水屮，调pH至7.2~7.4,加入琼脂，加热溶解，分装, 于121°C压力蒸汽火菌20min备用。 7.营养肉汤培养基 蛋白豚10g 牛肉膏5g 氯化钠5g 蒸彳留水 lOOOmL 将各成份溶解于蒸镭水屮，调pH至7. 2?7. 4,分装，于121°C压力蒸汽灭菌20min 备用。 8?胰蛋白豚大豆肉汤培养基(TSB) 胰蛋白月东 1.5% (g/100mL) 大豆蛋白腺 0. 5% (g/100mL) 氯化钠 0.5% (g/100mL) 用蒸徭水配制而成，调节pH为7.2±0.2,经121°C压力蒸汽灭菌后使用。 9?胰蛋白腺大豆琼脂培养基(TSA) 胰蛋白腺 1.5% (g/100mL) 大豆蛋白豚 0.5% (g/100mL) 氯化钠 0.5% (g/100mL) 琼脂 1.6% (g/lOOiriL ) 用蒸僧水配制而成，调节pll为7.2±0.2,经121°C压力蒸汽灭菌后使用。 10.品红亚硫酸钠培养基 蛋白月东log 酵母浸膏5g 牛肉膏5g 乳糖10g 琼脂15g?20g 磷酸氢二钾3. 5g 无水亚硫酸钠5g 5%碱性品红乙醉溶液 20mL 蒸镭水 lOOOmg 以上备成分蒸催水溶解，调pll至7. 2?7. 4,装瓶，经121°C压力蒸汽灭菌后使用。 11 ?漠甲酚紫蛋白陈培养液 蛋白豚10g 葡萄糖7. 5g 蔗糖 2. Og 可溶性淀粉1.5g 1瞬臭甲酚紫乙醇溶液1.3mL 蒸镉水至lOOOmL 将蛋白腺、葡萄糖、蔗糖溶解于蒸镭水屮，调pH至7. 2?7. 4,加入1%漠甲酚紫乙醉 溶液，摇匀后，分装每管5mL,于115°C压力蒸汽灭菌30mino置4°C冰箱备用。 嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基 蛋白豚10g 牛肉膏 可溶性淀粉lg 匍萄糖lg 琼脂20g 蒸锢水 lOOOmL 以上各成分蒸镭水溶解，调pH至7.0?7. 2,装瓶，经115°C压力蒸汽灭菌30min后使 用。 沙堡琼脂培养基 葡萄糖40g 蛋白腺10g 琼脂20g 蒸镉水 lOOOmL 将上述成分混合后，加热至完全溶解，调pH至5. 6±0. 2,于115°C压力蒸汽灭菌30min 备用。 14.沙堡液体培养基 葡萄糖40g 蛋白豚10g lOOOmL蒸僧水 lOOOmL 将上述成分混合后，加热至完全溶解，调pH至5. 6±0. 2,于115°C压力蒸汽灭菌30min 备用。 15? 15?麦芽浸膏琼脂培养基(MEA)麦芽浸膏 30g 3g大豆蛋白月东 3g 琼脂 15g 双蒸镭水 加至 lOOOinL 将上述成分制成溶液与121°C, 15m