离体蛙类心脏灌注及药物的影响-精选文档.ppt

主要内容 ? 实验目的 ? 实验原理 ? 实验步骤 ? 注意事项 ? 实验后处理 1 实验步骤： ? 制备离体蛙心 取蛙，破坏脑和脊髓 剪开胸腔和心包膜， 辨认蛙心结构 结扎右主动脉，结扎静脉 （避开静脉窦） 左主动脉处结扎、切口、插管、固定、 剪断， 蛙心离体 1 ? 连接实验装置 ? 实验装置参数设置 ? 给予处理因素 1 离子影响： 0.65%NaCl ； 2êCl2 ； 1%KCl 递质影响： 1:10000NA ； 1:100000Ach ； 1:2000 阿托品 +1:100000Ach 药物影响： 0.025% 毒毛旋花子甙 K 温度影响： 4 ℃林格液 酸碱影响： 2.5%NaHCO3 ； 3% 乳酸 +2.5%NaHCO3 1 记录 记录正常收缩曲线 幅 度： 心脏收缩的强弱 疏密度： 心搏频率 规律性： 心搏的节律性 基 线： 心室舒张的程度 1 注意事项： 1. 制备离体蛙心标本不要伤及静脉窦；插管 2. 插入左心室后要及时将血液吸出，以防堵塞。 2. 保持蛙心的活性，注意滴加林格液。 3. 每次换液时蛙心内的液面应保持大致相 同的高度 ( 负荷相同 ) 。 4. 吸管要分开使用。 1 5. 加药时先加 1 滴，出现效应后应及时更换 为林格液。 6. 每次施加处理因素前应先记录一端正常曲 线，做好标记，要有恢复曲线。 7. 注意保护换能器，不要过度牵拉，液体不 要滴在上面。 1 实验结果处理 1. 截取各种处理因素具有代表性的蛙心收缩 曲线，制成 单页图 打印出来。 2. 分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响及其 原理，写出实验报告。 1 1 1. 等量 0.65%NaCl, 收缩力减弱，心率加快 + 2+ 0.65% NaCl 渗透压与林格液相同但缺 K ,Ca Ca 2+ 减少，收缩力减弱 + + K 减少，膜对 K 通透性降低，静息电位绝 对值减少 K + 外流减少， Na + 内流增加， 4 期 If 增强 1 2. 2% CaCl2 胞外 Ca2+ 浓度升高，内流增多，心肌 收缩力增加，幅度增大；但胞内 Ca2+ 过 多，肌钙蛋白与 Ca2+ 结合不能解离发生， 导致心肌舒张不完全，严重者可发生钙 僵，图中表现为收缩曲线上移。 Ca2+ 浓度升高，抑制 Na+ 内流 1 收缩力增加，心率减慢 3. 1% KCl ， 收缩力减弱，心率减慢 + 2+ 胞外 K 浓度升高， Ca 内流减少（竞争） 胞外 K + 浓度升高，静息电位绝对值减少， ＋ 低于 -55~-60mV 时，快 Na 通透失活，兴 奋性下降，心率减慢，甚至停止在舒张 期 1 4.NA 收缩力增加，心率加快 NA 与心肌 β 受体结合后，激活 AC,Ca2+ 通道开放增加，正性变力、 变时、变传导 1 5.Ach 收缩力减弱，心率减慢 Ach 与心肌细胞膜上 M-R 结合， 抑制 AC ，抑制钙通道，同时激活 + G K 蛋白， K 外流增加，负性变力、 变时、变传导 1 6. 阿托品 +Ach ， 无明显变化 阿托品为 M 胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心 无神经支配，无 ACh 释放，加入阿托品后无 明显作用； 再加入 Ach ，由于阿托品已将 M 胆碱受体 阻断，故 Ach 无作用。 1 7. 毒 K 收缩力增加 抑制 Na + -K + － ATP 酶使细胞内 Na + 量升 高， K + 下降，胞内 Na + 升高，可促进细胞 内外 Na + -Ca 2+ 交换 , 使细胞内 Ca 2+ 增多，从 而加强心肌细胞收缩力。 2+ （毒 K 的作用有赖于胞外 Ca 的存在） 1 8. 4℃冷林格液 收缩力减弱，心率减慢 温度过低时，肌凝蛋白头部 ATP 酶 活性降低酶活性降低，代谢水平降 低，