中药制剂质量分析 控制菌检查 控制菌检查.pptVIP

作者：八音魔琴 中药制剂质量分析 ●中药制剂检查 ●中药制剂鉴别 ●中药制剂含量测定 贰 叁 肆 伍 壹 目录 中药制剂分析概述 中药制剂的鉴别技术 中药制剂的常规检查技术 中药制剂的杂质检查技术 中药制剂的卫生学检查 陆 中药制剂的含量测定技术 精诚制药 本草济民 伍 项目五 中药制剂的卫生学检查 任务一 中药制剂微生物限度检查 知识点四 中药制剂控制菌检查 1 2 一、基础知识 中药制剂控制菌检查 (二)培养基适用性 (一)控制菌的检查内容 控制菌检查用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配 制的培养基均应进行培养基的适用性检查。控制菌检査用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。 3 4 上面的图片可自行更换，动画效果不变，方法是对图片点右键-设置对象格式-填充-填充效果-图片，选择事先准备好的图片即可。 (三)阳性对照和阴性对照 4 (四)控制菌检查基本程序 阳性对照试验：阳性对照试验的对照菌的加量应不大于l00cfu。阳性对照试验应检出相应的控制菌。 阴性对照试验：以稀释剂代替供试液照相应控制菌检查法检查，阴性对照试验应无菌生长。如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。 中药制剂控制菌检查 一、基础知识 二、必备知识-大肠埃希菌检查 胆盐乳糖液体培养基； 曙红亚甲蓝琼脂培养基； MUG液体培养基； pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液； (一)培养基和稀释液 中药制剂控制菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 I M Vp C 试验材料，待检测药品。 酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、吸球、记号笔、剪刀、废物缸、水浴锅、光学显微镜、革兰氏染色试剂、超净工作台、生化培养箱、电炉子等。 (二)材料用具 中药制剂控制菌检查 1、供试液制备 取两支供试品，无菌操作加入空三角瓶中，混合均匀，取10ml灭菌吸管取10ml药品放入装有90ml稀释液的三角瓶中，混匀，制备成1:10的供试液。 2、増菌培养 取乳糖胆盐培养基3瓶，每瓶100ml，2瓶分别加入规定量的供试液（相当于1g或1 ml供试品），其中1瓶加入对照菌50～100个作阳性对照菌，第3瓶加入与供试液等量的稀释液作阴性对照，30～35℃培养18～24h。 3、MUG-I检查 摇匀上述乳糖胆盐增菌培养基，用灭菌吸管吸取0.2ml分别接种至5mlMuG培养基管内培养，分别在5h与24h时，取未接种的MUG培养基管做本底对照，将各管置365nm紫外光观察有无荧光。然后加靛基质试液4-5滴于上述MUG管中，观察液面颜色，供试液按结果进行判断或做进一步检查。 4、分离培养 取供试液增菌液及阳性对照培养液轻轻摇动，以接种环蘸取1～2环培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板，培养18～24h，当阳性对照的平板呈典型菌落生长，供试液培养物的分离平板无菌落生长，判为未检出大肠杆菌。若有疑似大肠杆菌的菌落生长，则进行生化反应试验。 5、生化试验 ①靛基质试验（I） ②甲基红试验（M） ③乙酰甲基甲醇生成试验（V-P） ④枸橼酸盐利用试验（C） 6结果判断 步 骤 中药制剂控制菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 (四) 结果判断 中药制剂控制菌检查 MUG 靛基质 有蓝白荧光:MUG阳性 无蓝白荧光:MUG阴性 有玫瑰红:阳性 无玫瑰红:阴性 MUG阴性(无荧光) 靛基质阴性(试剂本色) 判未检出 大肠埃希菌 MUG阴性(无荧光) 靛基质阴性(试剂本色) 判未检出 大肠埃希菌 MUG阳性、靛基质阴性 MUG阴性、靛基质阳性 疑似,需做 进一步检查 划线分离 中药制剂控制菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 革兰染色、镜检 疑似菌的确证试验 靛基质试验 甲基红试验 乙酰甲基甲醇生成试验 枸盐酸盐利用试验 生化试验 I M VP C 胆盐乳糖疑似培养物 疑似 菌落 报告未检出 18～24h 无菌或 无疑似菌落 EMB/ MacC 营养琼脂斜面 纯培养 18～24h (四) 结果判断 M-甲基红实验 （M） 乙酰甲基甲醇试验 （VP） 靛基质试验 （I） 枸橼酸盐 利用试验 （C） 中药制剂控制菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 (四) 结果判断 大肠埃希菌 I M Vp C 试验 中药制剂控制菌检查 二、必备知识-大肠埃希菌检查 (四) 结果判断 若MUG阳性 靛基质阴性 IMViC试验为－＋―― 革兰氏阴性短杆菌 若MUG阴性 靛基质阳性 IMViC试验为＋＋―― 革兰氏阴性短杆菌 判检出