微小昆虫永久玻片标本的制作方法.pdfVIP

第27卷 第3期 内蒙古民族大学学报（自然科学版） Vol.27 No.3 2012年5月 JournalofInnerMongoliaUniversityforNationalities May2012 微小昆虫永久玻片标本的制作方法 武迎红 （内蒙古民族大学 动物科技学院，内蒙古 通辽 028043） 〔摘 要〕介绍了微小昆虫永久玻片标本制作的基本方法和技术要点. 〔关键词〕微小昆虫；玻片标本；制作技术 〔中图分类号〕Q95-34 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185（2012）03-0322-02 ProductionofPermanentSlidesSpecimensofTinyInsect WUYing-hong (CollegeofAnimalScienceandTechnology,InnerMongoliaUniversityforNationalities;,Tongliao028042,China) Abstract：Inthispaper,thebasicmethodsofspecimenpreparationandtechnicalpointswerestudiedonpermanentslidesof tinyinsects. Keywords:TinyInsect;SlidesSpecimens;Production 微小昆虫如蓟马、蚜虫、蚤、虱和瞒类以及昆虫的某些附肢如口器、足、触角、翅、雌、雄外生殖器，往往要做成整体封藏 的玻片标本才便于在双筒体视显微镜和显微镜下观察、研究与鉴定.所以整体封藏玻片的制作是研究昆虫的一项基本操 作，需要熟练地掌握.由于昆虫个体大小有差异，器官骨化程度以及色素沉积深浅很不一样，因而玻片标本的制作有各自特 点，但总的原则和操作步骤是相同的.永久玻片制作一般要经过杀死与固定、软化处理、洗涤、脱水、透明及封藏等步.必要 时还需进行染色.永久玻片制作经过脱水、透明，又用折射率高的封藏剂封片，所得的玻片标本清晰度高并可保存多年，甚 至数十年. 1 制作方法 1.1 杀死与固定 微小昆虫和昆虫的器官构造，一经解剖或直接取材后应立即用固定液将组织细胞杀死固定.固定后的材料就不会变 质、变形.用75%的酒精处死或毒瓶杀死，也可用沸水杀死固定；常用的固定液是70％～75％的酒精液.这个浓度的酒精不 仅适于作固定液使用，若按1％浓度加进甘油还可用于保存标本.此外也有用4％浓度的福尔马林或布勒（Bless）氏固定液 固定材料.这两种固定液的配方如下： 4 ％福尔马林液：甲醛（formalin）（40％）10ml;蒸馏水90ml. 布勒（Bless）氏固定液：甲醛（formalin）（40％） 7ml;冰醋酸（glacialaceticacid）3ml；70％酒精（ethylalcohol）90ml 1.2 软化处理 由于昆虫体壁都有不同程度的骨化以及固定引起硬挺，为了避免在整肢展翅时使材料损伤，常在固定后将标本软化. 用 10%的KOH或NaOH浸泡，气温低时用水浴方式间接加热（约5min）；用5％氢氧化钾或乳酸酚，或70％乳酸对材料进 行软化处理.软化有利于封片前的整肢展翅而不易损伤材料；同时可使色素沉积深的材料脱去部分色素而透明，表现出丰 富的层次而利于观察；对体表的蜡质、脏体内的脂肪、肌肉起到消蚀溶解的作用，有利于清洁材料而使之洁净. 氢氧化钾是碱性软化剂，而乳酸酚和乳酸则为酸性软化剂，后两者对材料的软化作用不如氢氧化钾的作用强烈. 浸渍材料的氢氧化钾水溶液一般是5％～10％的浓度.软化处理时将已经杀死固定的标本（干燥多年的标本也可）投 入 5％的氢氧化钾水溶液中，一般水浴煮沸5～10 min就可以.对那些坚挺、颜色极深的材料可适当延长加热的时间或把 氢氧化钾水溶液浓度稍提高.使用浓度的高低、处理时间的长短完全要视虫体的大小、材料的骨化程度而定.为了避免材料 作者简介：武迎红，内蒙古民族大学动物科技学院高级实验师. 第3期 武迎红：微小昆虫永久玻片标本的制作方法