生物技术概论4 发酵工程.pptVIP

3.1发酵原料的预处理 原料不同处理方法也有所差异。 1. 淀粉——利用前需变成糊精或葡萄糖 方法：酸水解（高压、耐酸）、酶水解法 2. 糖蜜——加热杀菌和用水冲稀，也可加酸处理后再补充无机盐 3. 碳氢化合物：石油脱蜡——一定馏分的石油经冷却脱蜡而获得的凝固点在-10℃的油，加入适量无机盐进行接种发酵 3.2菌种斜面培养 菌种：已有的优良生产菌种和选育的新菌种 方法：一般都是由保存于冷冻管及砂土管或冰箱中的斜面菌种开始，在正式使用前要先转接到新鲜斜面培养基上活化后，再用于种子扩大培养。 3.3 种子扩大培养 扩大培养的方法可以根据需要采用固体培养或液体培养两级不同方式。 固体种子扩大培养一般采用传统的制曲工艺，一般先用克氏瓶或匣子瓶进行扩大，再转接到曲盘扩大培养。 需氧微生物：将克氏瓶表面培养的菌种接到装有液体培养基的三角瓶中，在摇庆上振荡培养。 厌氧微生物：将有菌种的试管斜面或克氏瓶转接到三角瓶液体培养基中静置培养。 3.4 微生物发酵和控制 发酵方式可分为固体发酵和液体发酵两种。 固体发酵：适合于传统发酵工艺及乡镇企业用来生产比较简单的产品。 液体深层发酵：适合于大规模工业化生产。 影响发酵的因素很多，如温度、pH、通风、搅拌、罐压力等等，必须适当地控制影响发酵的各种条件，掌握发酵的动态，并进行杂菌的检查和产物测定，使整个发酵过程顺利进行。 3.5 发酵产物的分离提取 利用菌体：离心沉淀或板框压滤法使菌体与醪液分开，也可以用喷雾干燥法直接做成粉剂。 酒精——发酵醪蒸馏塔蒸馏； 抗菌素及有机酸——根据产物的不同特性，采用离子交换树脂吸附处理、脱色过滤、减压浓缩等方法提取精制。 获得的产物都要按照有关部门制定的国家标准进行质量检验和性能测定，符合要求后才为合格产品。 自然突变的两种原因： 自发突变一般存在两种原因： 一种是自然环境中存在的低剂量的宇宙射线，各种短波辐射等作用引起的突变； 另一种是四种碱基瞬间的互变异构引起，这种互变异构无法预测，因此基因的自然突变也难以预知，根据统计，这种突变的概率大约为 10-8--10-9 诱变育种的诱变原理： 诱变育种是人为的利用物理，化学因素，使诱变的细胞内遗传物质染色体或DNA的片段发生缺失，异位，倒位，重复等畸变，或DNA的某一部位发生改变，从而使微生物的遗传物质DNA和RNA的化学结构发生变化，引起微生物的遗传变异。 诱变的方法： 物理诱变： 物理诱变的因素很多，有紫外线，Χ射线，γ射线，快中子，β射线等，近来还研究利用激光进行诱变处理。 化学诱变： 化学诱变剂：不少有机和无机化合物有诱变作用，统称诱变剂，但效果好的只有10多种，主要的有亚硝酸，羟胺，乙烯亚胺，硫酸二乙酯，氮芥，亚硝酸胍，吖啶橙，碱基类似物等。 变异菌株的筛选： 经诱变后，菌种的性能有可能发生各种各样的变异，如营养变异，抗性变异，代谢变异，形态变异，生长繁殖变异和发酵温度变异等， 筛选方法：营养缺陷型突变菌株筛选，抗反馈抑制变异株筛选，抗分解代谢阻遏突变株筛选，抗性突变株等。 菌种的保藏： 菌种保藏的原理主要是根据微生物生理生化特点，人为地使菌种长期处于低温，干燥，无氧，避光及缺乏营养等状态中，微生物在这种极端条件下代谢不活泼，很少发生变异。常用的保藏方法：斜面保存法，石蜡油保藏法，干燥保藏法，真空冷冻干燥保藏法等。 影响发酵过程的因素 1、预处理目的：在于改变发酵液的性质，以利于固液分离。 如：在活性物质稳定性的范围内，通过酸化，加热以降低发酵液的黏度，还可以加入絮凝剂使细胞或溶解的大分子聚结成较大的颗粒。 固液分离（发酵液的过滤）：将悬浮在发酵液中的固体颗粒与液体进行分离的过程。 2、提取： 萃取： 利用混合物组分对某种溶媒的溶解度不同，而将混合物加以分离。 沉淀：利用某些产品能和某些酸，碱 或金属盐类在水中形成难以溶解的盐或复盐的特性，而从滤液或浓缩液中把产品沉淀或结晶析出的分离过程。 3、精制：层析法 4、成品加工：干燥 代谢产物：可采用蒸馏，萃取，离子交换等方法提取。 菌体自身：可采用过滤，沉淀等方法从培养液中分离出来。 液体发酵类型： 静置培养：适合于厌氧菌发酵；如乙醇，丙酮，丁醇，乳酸发酵等 通气培养：适合于好氧菌发酵，如抗生素，氨基酸，核苷酸发酵等 发酵罐类型： 固体发酵罐 液体发酵灌 液体发酵罐： 厌气和好气 好气发酵罐： 机械搅拌式：通用式和自吸式 通风搅拌式：循环式和高位塔式 1 菌种选育（上游技术） 要想通过发酵工程获