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7 Li 离子辐射致 DNA 断裂 碎片的 AFM 观测 (AJ- Ⅲ型 AFM) （ A ） 剂量为 4.1Gy （ B ） 剂量略大于 10Gy DNA 受重离子辐射后的 结构变化和碎片长度分布 赵 葵 隋 丽 倪嵋楠 郭继宇 梅俊平 孔福全 路秀琴 周 平 原子能院核物理所 第十次全国核结构讨论会 脱氧核糖核酸（ DNA ） 腺嘌呤 腺嘧啶 鸟嘌呤 胞嘧啶 脱氧核糖核酸（ DNA ） ? 在辐射生物学和放射医学中， DNA 是电离辐射引致细胞杀伤或转化的 主要靶分子 。 ? DNA 的辐射损伤是辐射所致生物效 应中 最基本和最关键的一环 。 电离辐射致 DNA 的损伤 ? 电离辐射损伤 DNA 途径 : 直接作用 指射线直接作用于 DNA 分子，通过电离和激发使 DNA 受到损伤。 间接作用 指射线与 DNA 周围其它 原子或分子特别是水分子 作用，产生具有很高活性 的自由基（如 · OH ， · H 和 e aq - ）进而损伤 DNA 。 碱基变化 脱氧核糖变化 DNA 链断裂 — 单链断裂（ SSB ） 双链断裂（ DSB ） 交联 — DNA 链交联 DNA- 蛋白质交联 其中 DSB 是辐射所致生物学效应中 最 重要的原初损伤 ，而 非重接性的 DSB 则被 认为是细胞杀伤效应的最重要的损伤。 电离辐射致 DNA 分子的变化 DNA 链断裂示意图 单链断裂 双链断裂 单链断裂：是 DNA 双螺旋结构中一条链断裂。 双链断裂：是 DNA 的两条互补链于同一对应处或相邻处同时断裂。 ? 是具有 高传能线密度 （ LET ）的 电离辐射，它所引起的能量沉积 密集，局部剂量大。 与低 LET 辐射 ( 如 X 、 ? 射线和 电子束等 ) 相比，通过物质时有 完全不同结构的电离径迹，所引 起的损伤机制也极为复杂。 重离子的特征 质子和碳离子在水中径迹比较 国内外的研究 DSB 的方法 ? 中性梯度沉降 ? 中性过滤淘析 ? 凝胶电泳 ? 早期染色体凝缩 ? 电子显微镜 ? 原子力显微镜 这几种方法都有一定 的适用范围和局限性， 不同程度地存在着灵 敏性差、物理基础不 清楚及操作复杂等缺 点。近来的一些研究 证实，这些方法低估 了 DSBs 的产额。 原子力显微镜 (AFM) 原理 具有可达几纳米的高分辨 本领， 可以研究包括绝缘体和 导体在内的许多不同材料的表 面原子结构和组织形态，还可 以用于 有机分子 和 生物样品 的 研究。因而有更加广泛的应用 领域。 原子力显微镜 (AFM) 特点 利用 AFM 研究 DSB 状况 利用 AFM 观测电离辐射致 DNA 双 链断裂在国外（从 1996 年起）仅 有的几个实验研究中，所用的电 离辐射源是 电子、 X 射线、 γ 射线 和 ? 粒子， 给出了辐照后 DNA 分子 的结构变化。 利用 AFM 研究 DSB 状况 (1)1996 年美国乔治华盛顿大 学的 D.PANG 等人用 AFM 在水溶 液中测量 辐射 ( 电子 ) 引起的 DNA 双链断裂的第一个实验。 （ D.Pang et al. Scan.Microsc. 10(1996)1105-1110 ） (B) 50 Gy ， 750-850nm 占 88 ％，平均长度 790nm (C)100 Gy ， 750-850nm 占 67 ％， 143-750nm 占 23 ％，平均长度 690nm (D)150 Gy ，最多碎片 200nm 长，占 40 ％， 平均长度 400nm (E)200 Gy ， 50-150nm 占 36 ％， 150-250nm 占 32 ％，平均长度 200nm 利用 AFM 研究 DSB 状况 (2)1998 年 D.Pang 等人又用同样 方法测量了 中子 引起的 DNA 损伤。 （ D.Pang et al., Radiation Research 150(1998)612-618 ） 中子对 DNA 的辐射，导致了许多 短碎片的产生， DSBs 的分布更局部、 更密集。为成团的 DNA 双链断裂提供 了实验证据。 （