急性眼刺激性试验SOP.docxVIP

急性眼刺激试验标准操作规程 目的：确定评价化学品对哺乳类动物眼睛是否有刺激作用及 其程度。 概述：受试样品以一次剂量加入每只实验动物的一侧眼睛结 膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照；在规定的时限内， 观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试样品对 眼睛的刺激作用。观察时间赢能足以评价刺激效应的可逆性和不可逆 性。观察时间最少72小时，但是一般不超过21天；当动物出现严重 和持久的痛苦迹象是，以适当的方式将动物处死；强酸物质或强碱物 质，由于其可预见的腐蚀特性，不必做本实验；已在皮肤试验中证实 具有腐蚀或严重刺激毒性的物质不必进行眼刺激试验；在充分并公认 的体外试验结果中确定可能产生刺激性或腐蚀性的物质不必进行体 内试验。 1;样品处理 液态受试样品，一般不需要稀释，可直接使用。不溶性或难 溶固体或颗粒状物质，应 其研磨成细粉状，过74微米孔径筛。气溶 胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。对挥发性物质，剂量可以 通过使用前后称量容器质量进行估值。 2;实验动物：成年白兔，2000克到3000克 （1） 可预见有严重反应的受试样品，先考虑用一只 动物试验，结果有反应，则不必进行，不反应 贝打至少需要3只动物。 3;剂量设计；液态受试样品染毒量为 0.1ML。若受试样品为 固态难溶颗粒状，染毒量应为100MG。 4;试验步骤 （1） 试验前眼睛的检查 试验前动物药在动物实验室环境中至少适应 3天。试验前24 小时，要对实验动物的两只眼睛进行常规检查。有眼睛刺激 症状，角膜缺陷或结膜损伤的动物不能用于试验。 （2） 染毒；轻轻拉开实验动物一侧眼睛的下眼睑， 将受试样 品0.1ml （或100mg）滴入结膜囊中，使上，下眼被动 闭合一秒，以防止受试样品丢失。未处理的另一侧眼睛 作为自身对照。 （3） 滴入受试样品24小时内不冲洗眼睛，如果认为必要， 在24小时可进行冲洗。 （4） 根据表2的评价标准，如果受试样品出现中度以上刺激 性时，必需时另选3只动物进行冲洗试验，滴入受试样 品闭合一秒，30秒后用生理盐水冲洗5分钟，水的流 量和流速都不应导致眼损伤。 5;观察及评分 观察时间最少72小时，但应足以评估观察到可逆或不可逆效应。观 察时间一般不超过21天。 临床检查和评分； 在滴入受试样品后的第一小时，24小时，48小时，72小时对眼睛进 行检测，如果72小时为出现刺激反应，可终止试验。如果发现累及 角膜或有其他眼刺激作用，7天内不恢复者为确定该损害的可逆性或 不可逆性需延长观察时间，一般不超过 21天。观察和记录结束后， 可使用荧光素钠对所有动物的眼睛做进一步检查。 在每次检查中均应 按表1记录眼的刺激反应，并按表2进行眼刺激评价。 观察进行时，可使用放大镜及裂隙灯。 表1眼各部位损伤评分表 损伤情况 评分 角 膜 O浑浊程 度（以最 字谜部位 为准） 无浑浊 0 散在或弥漫性浑浊，虹膜清晰可见 1 半透明区，虹膜轻度模糊不清 2 出现灰白色半透明区，虹膜模糊不 清，瞳孔大小勉强可见 3 角膜浑浊，虹膜无法辨认 4 A角膜受 损范围 （出现任 何浑浊的 总面积） 小于1/4 1 1/4-1/2 2 1/2-3/4 3 3/4-1 4 角膜损伤加权积分=0*A*5最高积分为80 虹膜 I虹膜损 伤 正常 0 皱褶明显加深，充血，水肿，角膜 周围有充血（出现任何一项或任何 两项）对光反应迟钝。 1 对光反应消失，出血，肉眼可见严 重损伤（出现其中一项或全部） 2 虹膜损伤加权积分=1*5最高积分为10 结膜 R充血一 血管正常 0  （指睑 血管充血，呈鲜红色 1 结合膜 血管充血，呈深红色，个别血管难 2 和球结 以辨认 膜 弥漫性充血，呈深紫红色 3 S水肿 无水肿 0 轻微水肿伴部分眼睑外翻 1 明显水肿伴部分眼睑外翻 2 水肿至眼睑近半闭合 3 水肿至眼睑超过半闭合 4 D分泌 无 0 物 少量分泌物（不包括动物内眦少量 分泌物） 1 分泌物使整个眼区潮湿或粘着 2 分泌物使整个眼区潮湿或粘着 3 结膜损伤加权积分 =（R+S+D）*2最高积分为20 角膜，虹膜和结膜反应累加最高积分为 110  表2眼刺激强度评价标准 染毒后4天 内最咼总积 分平均值 刺激反应持续时间（总积分平均值） 刺激强度 0- 第天》0 无 2.5- 第二天》0 轻 15- 第四天=0 轻 第四天〉0 中 25- 第七天w 20,半数以上动物第七天w 10 中 第七天w 20,半数以上动物第七天〉10, 但是无任何一只动物第七天＞ 30 中 第七天w 20,半数以上动物第七天〉10, 而且有一只动物第七天〉30 重 第七天〉0 重 50- 重 彷徨失意时，一句懂得，是严冬的一场花开春暖，茫然无助时，一句懂得, 是酷暑的一阵清凉