现代医学试验学_靶向血管抗肿瘤药物研究方法.ppt

靶向血管的抗肿瘤药物研究方法 陈雪红 人体机能实验室 靶向血管的抗肿瘤药物在临床肿瘤治疗中 的意义 恶性肿瘤在全球范围内已成为常见病、多发病， 据世界卫生组织报告，全球 50 多亿人口中，每年新 诊断的肿瘤患者约为 900 万人，因肿瘤而死亡者达 700 万人，占总病死率的近 20% 。 传统的肿瘤治疗方法如手术、放疗和化疗虽有 一定的进展，但都有它们本身的局限性。 1971 年，美国科学家、哈佛大学医学院教授 Judah Folkman 首次提出 肿瘤的生长浸润依赖于肿瘤内新生血管的形成这一观点。随后，在这一领 域的研究逐渐深入，针对肿瘤新生血管的治疗策略层出不穷。 肿瘤血管的生成 ? 血管前期 肿瘤聚集体生成后即进入无血管生长期 , 通过弥散作用使肿瘤获得足够的营养和氧 , 并运 走代谢产物。当肿瘤体积增至 (1 ～ 2)mm3 以上时 , 如无新生血管长入 , 肿瘤组织将保持休眠状态 或发生退化。 ? 血管期 一旦血管长入肿瘤 , 血液供应变为灌注 , 肿瘤将快速生长并达到难以控制的体积。多种组 织的肿瘤内微血管密度 (MVD) 高于正常。新生血管不仅为肿瘤组织提供足够的营养和氧 , 还提 供大量的生长因子和存活因子 , 促进其生长。 肿瘤血管和正常血管的区别 ? 不成熟：血管管腔内皮细胞不连续、基膜异常 ? 内皮形状异常、相互之间联系松散 ? 对大分子的渗透性高以及由此引起的高的间隙压 ? 增殖快，增殖细胞比例高，血管平滑肌层不完整或 缺乏 ? 血管系统杂乱无序，具有复杂的分支系统，血管直 径异常，分支点之间距离较长，对于血流的阻力较 大 ? 血流速度低，甚至是间断的 ? 毛细血管中包含高水平的血红蛋白，缺氧的微环境 Blood flow rate (ml/g/min) 靶向血管的抗肿瘤药物分类 ? 靶向新生肿瘤血管的药物 肿瘤新生血管生成抑制剂 （ tumor angiogenesis inhibitors ， TAIs ） 抗血管新生，主要通过改变促进和抑制血管生成因子的平衡关系来抑制肿瘤 新生血管的生长，如阻断促血管生成因子与其受体结合，使用抗血管生成因子等。 代表药物： TNP — 470 、血管抑制素（ Angiostatin ） 、内皮抑制素 （ Endostatin ）、凝血栓蛋白（ Thrombospondin — 1 ） ? 靶向既成肿瘤血管的药物 血管破坏剂 （ vascular disrupting agents, VDAs ） 血管靶向，利用肿瘤血管内皮细胞生长活跃，特异地高表达一些分子的特性， 构建相关的耦联毒素或同位素的抗体（生物导弹），或者制成这些肿瘤血管内皮 细胞相关分子的疫苗，靶向性地杀伤肿瘤血管内皮细胞。 代表药物： CA 4 P 、 ZD6126 ， FAA VEGF 抑制剂：抗 VEGF 单克隆抗体 贝伐单抗 (Bevacizumab,Avastin) 2004 年 2 月 26 日获得 FDA 批准上市用于一线治疗晚期大肠癌 , 在缓解率生存期、疾病进展时间等方面有明显疗效 。在晚期非小 细胞肺癌的临床应用中也取得满意疗效。 靶向血管治疗的特点 ? 肿瘤细胞不易产生耐药性； ? 肿瘤血管内皮细胞的有限损伤就可造成大量肿瘤细 胞的生长抑制，不会对骨髓和造血器官产生毒性； ? 抗血管生成治疗可应用到很多中恶性肿瘤，具有广 谱性 2001 年，中国医学科学院肿瘤医院联 合全国 24 家临床医院，对恩度进行了近 500 例的大规模临床实验。 2005 年 9 月 12 日，恩 度获得国家新药证书，成为拥有自主知识 产权的国家一类新药。 血管破坏剂分类 CA4 类药物 黄酮乙酸类药物 CA4P FAA DMXAA Disruption of endothelial cells by treatment with CA-4-P or DMXAA tubulin ( green ) actin (red) 研究方法 ? 体外筛选 血管内皮细胞模型；大鼠动脉环 ; 血管生成因子 模型；高通量筛选模型 ? 体内筛选 鸡胚绒毛尿囊膜模型、鼠耳模型、基质胶塞模 型、啮齿动物的角膜微囊、斑马鱼模型 ? 肿瘤模型 小鼠 Lewis 肺癌、黑素瘤 B16 在体观察血管发育的模式生物 模式生物：通常指人们研究生命现象过程中长期、反复作为 研究材料的物种，如，果蝇、线虫、斑马鱼、鸡胚、拟南芥等。 人们在对这些物种的形态、解剖、生理、生化、细胞及遗传进行 全面分析和归纳的基础上，把它们作为典范，将对其研究得出的 规律，推演到相关的生物物种中，从而加快了对其他各种生物的 研究。 模式生物的发展 早在 20 世纪最初的 20 年中，甚至更早到 20 世纪的 “上世纪”，人们就发现，如果把关注的焦点集中在