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川陈皮素和橙皮苷对脂肪积累影响的研究 肥胖在发达国家是一个主要的健康问题 , 近一些年来 , 肥胖在发 展中国家和不发达的国家中也日益成为危害健康的一个危险因素。 肥 胖会导致心血管疾病、 胰岛素抵抗和糖尿病等肥胖相关性疾病的发生 和发展 , 另外 , 肥胖被报道和某些癌症的发生相关。因此 , 抗肥胖的研 究变得十分重要。陈皮活性成分川陈皮素和橙皮苷常被用于抗肿瘤、 抗炎和抗高血压的研究。近年来 , 它们也被用于抗胰岛素抵抗和抗脂 肪积累的研究。为了验证川陈皮素和橙皮苷的抗肥胖潜力 , 本文将对 两者在 3T3-L1 细胞和线虫模型上的抗脂肪积累的功效和机制开展研 究, 得到的研究结果如下 :(1) 川陈皮素单独作用于 3T3-L1 细胞时 , 油 O染色结果和脂肪抽提定量实验显示 3T3-L1 细胞内的脂肪含量与对照组相比升高了 , 实时定量 PCR显示 3T3-L1 细胞内的脂肪生成基因 CEBP表达与对照组相比上调了 , 暗示川陈皮素在 3T3-L1 细胞内通过促进脂肪生成基因的表达来促进脂肪生成。 (2) 应用 PI3K/Akt 特异性阻断剂 LY294002阻断 3T3-L1 细胞内的 Akt 信号后 , 油红 O染色结果和脂肪抽提定量实验显示川陈皮素的升高细胞内脂肪含量的作用被 抑制 , 实时定量 PCR和 western blot 实验提示川陈皮素通过 PI3K/Akt 信号途径促进 3T3-L1 细胞内的脂肪积累。 (3) 在“鸡尾酒”诱导剂培 养基中 , 川陈皮素抑制 3T3-L1 细胞内的脂肪积累。 这种抑制作用得到 了脂肪抽提定量实验结果和实时定量 PCR结果的支持。进一步的诱导 剂成分的组合实验证明 , 川陈皮素只能通过和含有 IBMX和 DEX或胰岛 素的诱导剂成分组合来抑制 3T3-L1 细胞内的脂肪积累 , 然而 , 随后的 阻断 IBMX通路的实验暗示川陈皮素不通过 cAMP减少 3T3-L1 细胞内的脂肪生成。 (4) 应用 AMPK特异性阻断剂 CompoundC阻断 3T3-L1 细胞内的 AMPK后, 脂肪抽提定量实验和实时定量 PCR结果显示川陈皮素 恢复了细胞内脂肪积累的作用。进一步地 ,western blot 实验揭示 3T3-L1 细胞内的 PI3K/Akt 信号减弱和 AMPK活化相关 , 提示川陈皮素可能通过活化 AMPK而致 PI3K/Akt 信号抑制导致 3T3-L1 细胞内的脂肪生成减少。(5) 橙皮苷被首次发现可抑制线虫的脂肪积累 , 这种抑制作用可能是通过下调硬脂酰辅酶 A脱羧酶 FAT-6 和 FAT-7 基因表达来 实现的。上述的实验结果首先促成本实验提出了一个川陈皮素调节 3T3-L1 细胞内脂肪生成的信号途径模型 , 即: 川陈皮素通过 PI3K/Akt 信号途径调节 3T3-L1 细胞内脂肪生成。该信号模型的建立不仅增加 了有关川陈皮素的脂肪生成调节作用的理解 , 而且还为未来的抗脂肪 积累研究提供了理论上的新思路。另外 , 橙皮苷被发现可减少线虫体 内的脂肪生成 ,FAT-6 和 FAT-7 基因可能在橙皮苷的抑制脂肪生成作 用中扮演重要的角色。