细胞培养技术及医学应用_2.哈里森与卡雷尔的主要贡献_哈里森与卡雷尔的主要贡献.pptVIP

直到1907年，美国胚胎学家哈里森的实验才被公认为组织培养真正开始的标志，因为该实验但提供了可重复的技术，而且证明了生物组织的功能可以在体外十分明确地延续下去。 哈里森将蛙胚神经管区的一片组织移植到蛙的淋巴液凝块中，这片组织在体外不但存活了若干星期，而且居然还从细胞中长出了轴突(神经纤维)， 解决了当时关于轴突起源的争论，并表明了利用体外存活的组织进行实验研究的可能性。他所采用的把培养物放在盖玻分上并倒置于凹玻片腔中的方法还一直沿用至今，称为盖片复盖凹窝玻璃悬滴培养法 。 现代细胞培养是从哈里森(1907)和卡雷尔(1912)两人开始的。 在此基础上，1912年卡雷尔 则更加丰富和完善了此项技术，他将无菌操作技术引入动物细胞培养，在没有使用抗菌素的条件下使鸡胚心脏细胞在人工培养条件下生存了三十多年，并且先后传代3400次。并发现动物体液中存在着对动物细胞生长有强烈促进作用的生长因子。这一结论早已被现在的研究所证实，并成为无血清培养基研究的基础。由于这两个人的卓越成就，细胞培养从此开始了迅猛的发展，并成为生物工程特别是细胞工程中一项重要的基础技术. 1912年，当时的卡雷尔是外科医生，在实验中特别注意无菌操作。他用血浆包埋组织块外加胎汁的培养法，并采用了更新培养基和分离组织的传代措施，从而完善了经典的悬滴培养法。卡雷尔用这种方法，曾培养一鸡胚心肌组织长达数年之久。这些创造性的工作充分揭示：离体的动物组织在培养条件下，具有近于无限的生长和繁殖能力；并充分证明组织培养的确是研究活组织和细胞的极好方法。 1923年，卡雷尔在悬滴培养的基础上，设计了用卡氏甁培养离体的动物组织，是组织培养进入一个迅速发展的阶段。 卡氏甁可以较好地保证无菌环境，为细胞生长提供空间。 1948年研制成了第一个化学成分清楚的细胞培养CMRL1006，该培养液至今还在使用。 1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基。 1951年盖伊首建人肿瘤细胞-Hela细胞系。 1961年海弗里克首建人二倍体细胞系25种。 1990年，我国中科院建立了细胞库。