保健功效及检验方法.docVIP

一、多糖检测方法 （1）粗多糖苯酚-硫酸分光光度测定法 （2）葡聚糖分光光度测定法 （3）硫酸软骨素分光光度测定法 二、皂苷类化合物检测方法 （1）总皂苷分光光度测定法 （2）绞股蓝皂苷分光度测定法 三、黄酮及苷类化合物检测方法 （1）总黄酮风光光度测定法 （2）原花青素分光光度测定法 （3）原花青素铁盐催化比色测定法 四、酶、激素及内源性物质检测方法 （1）超氧化物歧化酶氮蓝四唑测定法 （2）超氧化物歧化酶连苯三酚自氧化测定法 （3）氯化高铁血红素分光光度测定法 五、其它类化合物检测方法 （1）总蒽醌分光光度测定法 （2）几丁胺糖脱乙酰度滴定法 （3）总三萜分光光度测定法 六、 第一章 概论 (第3页)表1-1 常见保健食品功效成份（标志性成份）、保健功效及关键起源 功效成份（标志性成份） 保健功效 关键起源 黄酮类 银杏黄酮、山楂黄酮 辅助降血脂、提升缺氧耐受力、抗氧化、增强免疫力、保护心血管系统、保护脑神经系统 银杏叶、山楂、蜂胶、葛根、沙棘、红花、荷叶、甘草、桑叶、陈皮、花粉、桑葚、黄芪、淫羊藿、鱼腥草 多糖类 灵芝多糖、香菇多糖 缓解体力疲惫、增强免疫力、辅助降血糖、辅助降血脂 灵芝、香菇、枸杞、银耳、灰树花、人参、西洋参、昆布、木耳、山药、黄芪、茯苓、猪苓、黄精、苦瓜 皂苷类 红景天苷、人参皂苷 缓解体力疲惫、增强免疫力、抗氧化、抗辐射、提升缺氧耐受力、辅助降血糖、保护心血管系统 人参、西洋参、红景天、绞股蓝、三七、山药、黄芪、酸枣仁、桔梗、远志、知母、甘草、大豆、蒺藜、太子参 蒽醌类 通便、美容、减肥、增强免疫力 芦荟、大黄、决明子、何首乌 花青素 抗氧化、增强免疫力、抗辐射、保护心血管系统 葡萄子、葡萄皮、越橘、黑加仑、玫瑰茄、甘蓝、桑葚、紫甘薯、茶叶 三萜类 灵芝三萜、角鲨烯 抗氧化、增强免疫力、抗辐射、缓解体力疲惫、辅助降血脂、辅助保护化学性肝损伤、改善睡眠、改善记忆 灵芝、赤芝、紫芝（孢子粉）、甘草、黄芪、人参、泽泻、积雪草、山楂、女贞子、苦丁茶、五味子、深海鱼油（金枪鱼、沙丁鱼、鲨鱼、鲑鱼） 壳聚糖（几丁聚糖） 增强免疫力、辅助降血脂、辅助降血糖、辅助保护骨粘膜 虾、蟹壳提取物 硫酸软骨素 辅助降血脂、增强免疫力、保护骨关节、参与制造骨骼 动物软骨 （第73页） 第三章 保健食品中功效成份检测方法 第一节 多糖检测方法 粗多糖苯酚—硫酸分光光度测定法 方法提要 多糖经乙醇沉淀分离后，去除其它可溶性糖及杂质干扰，再和苯酚—硫酸作用成橙红色化合物，其呈色度和溶液中糖浓度成正比，在485nm波长下比色定量。 4、测定步骤 样品提取：称取混合均匀固体样品1.0~2.0g，置于100mL容量瓶中，加水80mL左右，和沸水浴中加热1小时（如保健食品添加已是多糖提取物，则加热15min），冷却至室温后补加水至刻度线（V1）,混匀后过滤，弃去初滤液，搜集余下滤液供沉淀粗多糖。 在这里必需强调是不少保健品添加了淀粉、糊精，一定要做对应处理，不然结果偏高。添加淀粉样品需加α-淀粉酶及糖化酶（如葡萄糖苷酶）处理。添加糊精样品需加糖化酶（如葡萄糖苷酶）处理。 处理标准是将这类非活性多糖碳水化合物全部酶解成单糖或低聚糖，再用乙醇沉淀所需活性多糖以达成分离目标。 添加淀粉或淀粉+糊精样品：可取50mL样品提取液置于100mL具塞锥形瓶中，冷却至60℃以下，加1mL10%淀粉酶液（Singma企业液状淀粉酶可直接加0.1~0.2mL）和0.5mL0.2M磷酸盐缓冲液，加塞，至55℃~60℃酶解1小时，再加适量糖化酶（如葡萄糖苷酶）（约为样液体积1%）于60 添加糊精样品：如上法处理（免加淀粉酶） 沉淀粗多糖：正确吸收上滤液（或液体样品）5.0mL（V2），置于50mL离心管中（或2.0mL于15mL具塞离心管中），加入无水乙醇20mL（或8mL）,混匀，于4℃冰箱静置4小时以上，以4000r/min离心5min，弃去上清液，残渣用80%（V/V）乙醇溶液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次。残渣用水溶解并定容至10~25mL（V3）(依据浓度而定) 标准曲线绘制：正确吸收葡萄糖标准使用液0mL、0.10mL、0.20mL、0.40mLL、0.60 mL、0.80mL、1.00mL（相当于葡萄糖0mg、0.01mg、0.02mg、0.04mg、0.06mg、0.08mg、0.10mg）置于25mL比色管中，补加水至2.0mL,加入5%苯酚溶液1.0mL,在旋涡混合器上混匀，小心加入浓硫酸10mL,在旋涡混合器上小心混匀，至沸水浴中2min，冷却至室温，用分光光度计在485nm波优点以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡萄糖质量为横