Westernblot所需溶液的配制.docxVIP

精心整理 WB 所需溶液的配制 1 Tris- 甘氨酸电泳缓冲液 (Runningbuffer)5× Trisbase 15.14g Glycine(甘氨酸 ) 72.0g SDS 5.0g 蒸馏水 溶解至 1000ml 5×Tris- 甘氨酸电泳缓冲液： 15.1gTris 碱和 72ｇ甘氨酸， 5ｇ电泳级的 SDS，双蒸水定容至 1L，pH值为 8.3 。使用前，将 5×稀释到 1×：取 200ml5×，定容到 1000ml。 转膜缓冲液（ Sendingbuffer）（现用现配） 1000ml1500ml Glycine(甘氨酸 ) 14.413 g 21.6 g 1.0 MTris.HCl(pH8.3) 25ml 37.5ml 10%SDS 1ml 1.5ml 甲醇 (methanol) 200ml 300ml 蒸馏水 溶解至 1000ml 溶解至 1500ml 必须新鲜配置，因为甘氨酸溶于水后易分解。小片段可不加 SDS。 3 10%SDS配置 电泳级 十二烷基硫酸钠也叫 SDS（SodiumDodecylSulfate，SDS,C 12 H 25 4 ）溶液 ， O NaS :10gSDS 100ml 去离子水配制， 50-68 度搅拌溶解，浓盐酸调 pH 到 7.2，室温保存。 4 Tris.HCl 的配置 1.0MTris.HCl(pH8.8) Tris30