96 转录后加工（录）.pptVIP

三、rRNA的转录后加工 转录 剪接 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 45S - rRNA ??????????????????????????????????????????????????? ? ? ? ? ? The 5 cap (red) is added before synthesis of the primary transcript is complete. A noncoding sequence following the last exon is shown in orange. Splicing can occur either before or after the cleavage and polyadenylation steps. All the processes shown here take place within the nucleus. 5帽子（红色）在初始转录本的合成结束前就被加上。在最后一个外显子之后的非编码序列显示为橘黄色。剪接可以在短裂和多聚腺苷酸化作用之前或之后发生。图示的所有过程都发生在核内。 第三节 真核生物的转录后修饰 一、mRNA的转录后加工 5’端加帽子结构 3’端加poly(A)尾巴结构 mRNA的剪接 原初转录产物完成 原初转录产物 （hnRNA，核内不均一RNA） 成熟的mRNA 外显子 内含子 断裂 聚腺苷酸化 剪接 (一)首尾的修饰 1. 5′-端加帽：m7GpppG—— 2. 3′-端加尾：多聚腺苷酸 (poly A) 1. 帽子结构 5’Capping 通过 5′→ 5′磷酸二酯键在原初mRNA的5’端倒扣一个“G”。 在新生mRNA链达到50个核苷酸前，甚至可能在RNA Pol II 离开转录起始位点之前，帽子结构就已加到mRNA的第一个核苷酸上了。 5′末端加上鸟苷是由鸟苷转移酶催化的 。 帽子结构是GTP和原5’三磷酸腺苷（或鸟苷）缩合反应的产物。 mRNA的帽子结构常常被甲基化。 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG PPi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 　 加帽过程 真核生物mRNA的“帽子”结构 鸟苷酸-7甲基转移酶 2’-O-甲基转移酶 零类帽子（cap0）：第一个甲基出现在所有真核细胞的mRNA中（单细胞真核生物mRNA主要是这个结构），由鸟苷酸-7甲基转移酶催化，称为零类帽子。 1类帽子(cap1)：如在第二个核苷酸(原mRNA 5’第一位)的2’-OH位上加另一个甲基，这步反应由2’-O-甲基转移酶完成。一般把有这两个甲基的结构称为1类帽子。真核生物中以这类帽子结构为主。 2类帽子(cap2): 在某些生物细胞内，mRNA链上的第三个核苷酸的2’-OH位也可能被甲基化，因为这个反应只以带有1类帽子的mRNA为底物，所以被称为2类帽子。只占有帽mRNA总量的10%-15%以下。 mRNA的帽子结构常常被甲基化 加帽的功能 mRNA 5’加帽的功能主要表现在4个方面： （1）阻止mRNA的降解：细胞内存在许多RNA酶，它们可从5’端可攻击游离的RNA分子。当mRNA的5’端加上m7GpppG帽子后，可阻止RNase的切割，延长mRNA的半衰期。 （2）提高翻译效率 真核生物mRNA必需通过5’帽结合蛋白才能接触核糖体，起始翻译。缺少加帽的mRNA由于不能被5’帽结合蛋白识别，其翻译效率比加帽的mRNA低20倍。 （3）作为进出细胞核的识别标记 凡由RNA聚合酶II转录的RNA均在5’端加帽，包括snRNA，这是RNA分子进出细胞核的识别标记。如：U6 snRNA 由RNA聚合酶III转录，其5’端保留3个磷酸基团，无帽子结构，因而不能输出细胞核。 （4）提高mRNA的剪接效率 5’帽结合蛋白涉及第一个内含子剪接复合物的形成，直接影响mRNA的剪接效率。 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA 2. 3′-端加尾：多聚腺苷酸 (poly A) 绝大多数真核生物mRNA具有多聚(A)尾巴。 除组蛋白基因外，真核生物mRNA的3’末端都有多聚(A)序列，其长度因mRNA种类不同而变化，一般为40-200个左右。 由多聚(A)聚合酶催化的； 它是在转录后加上的