生物化学生素与酶.pptVIP

一、酶活力与酶促反应速度 1. 酶活力 酶催化一定化学反应的能力称酶活力,酶活力通常以最适条件下酶所催化的化学反应的速度（通常是初速度）来确定。 2. 酶促反应速度 酶促反应速度一般在规定的反应条件下,用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示。 2. 底物浓度对酶促反应速度影响 （1）在酶浓度,pH,温度等条件不变的情况下研究底物浓度和反应速度的关系。如右图所示: 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比,表现为一级反应特征。 当底物浓度达到一定值,几乎所有的酶都与底物结合后,反应速度达到最大值（Vmax）,此时再增加底物浓度,反应速度不再增加,表现为零级反应。 1. 酶浓度的影响——当底物浓度足够时,酶促反应速度与酶浓度成正比。 二、影响酶促反应速度的因素 （2）米氏方程 1913年,德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学说对酶促反映的动力学进行研究,推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式,称为米氏方程。 Km — 米氏常数 Vmax — 最大反应速度 米氏常数Km的意义: 由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半时,即V = 1/2 Vmax,Km = [S] 上式表示,米氏常数是反应速度为最大值的一半时的底物浓度。 因此,米氏常数的单位为mol/L,或mmol/L。 不同的酶具有不同Km值,它是酶的一个重要的特征物理常数。 Km值只是在固定的底物,一定的温度和pH条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的Km值。 Km值表示酶与底物之间的亲和程度:Km值大表示亲和程度小,酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。 * 2021/3/14 ③ 米氏常数的测定 基本原则: 将米氏方程变化成相当于y=ax+b的直线方程,再用作图法求出Km。 例:双倒数作图法（Lineweaver-Burk法） 米氏方程的双倒数形式: 1 Km 1 1 — = —— . — + —— v Vmax [S] Vmax * 2021/3/14 1/Vmax 斜率=Km/Vmax -1/Km * 2021/3/14 3. pH的影响——不同的酶有不同的最适pH值。 4. 温度的影响 在一定温度范围内（0~50℃）,酶的活力随温度升高而增加,超过一定温度界限,活力就下降。最高活力时的温度即为酶的最适温度。 5. 激活剂的影响 6. 抑制剂的影响 抑制作用:由于酶的必需基团或活性部位的性质与结构的改变,从而影响酶与底物分子的结合能力或减小酶的再生速率,使酶的活性降低或丧失的现象。引起抑制作用的物质称为抑制剂。 * 2021/3/14 (1) 抑制作用的类型 ① 不可逆抑制:抑制剂与酶的必需基团之间发生共价键结合,形成不可逆的酶-抑制剂化合物而使酶活性丧失。 酶的抑制剂一般具备两个方面的特点: a. 在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。 b. 能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 有机磷化合物 羟基酶 失活的酶 酸 路易氏气 巯基酶 失活的酶 酸 a. 有机磷化合物 ?? 羟基酶 b. 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 ② 可逆抑制:抑制剂与酶分子通过非共价作用形成可逆的酶-抑制剂复合物。抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 可逆抑制又可分为:竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制。 a. 竞争性抑制作用 定义:抑制剂与底物的结构相似,能与底物竞争酶的活性中心,从而阻碍酶-底物复合物的形成,使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 反应模式: 竞争性抑制作用的速度方程: * 特点 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及底物浓度; I与S结构类似,竞争酶的活性中心; 动力学特点:Vmax不变,表观Km增大。 抑制剂↑ 无抑制剂 1/V 1/[S] -(1/Km) -(1/K′m) * 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 琥珀酸 丙二酸 磺胺类药物的抑菌机制 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶 二氢叶酸 b. 非竞争性抑制作用 定义:酶