分子生物学第15章dna损伤与修复.pptVIP

思考题： 试说明DNA损伤的几种类型及修复合成主要方式的名称。 试述核苷酸切除修复的过程。 常见的DNA损伤及其修复机制 ` DNA损伤因素 DNA损伤类型 修复机制 X射线、氧自由基、烷化剂　 　 自发脱碱基 单链断裂、无碱基位点、氧化性碱基（如8-氧鸟嘌呤）脲嘧啶 碱基切除修复 紫外线和多环芳烃 环丁烷嘧啶二聚体等大的紫外线光产物和稳定的多环芳烃化合物等大分子DNA加合物 核苷酸切除修复 抗癌药（如顺铂和丝裂霉素） 双链断裂和链间交联 双链断裂修复（同源重组修复和末端连接） 复制错误和烷化剂 碱基错配和缺失（插入） 错配修复 一、直接修复 嘧啶二聚体的直接修复（光复活酶） 烷基化碱基的直接修复 （烷基转移酶） 无嘌呤位点的直接修复 （DNA嘌呤插入酶） 单链断裂的直接修复 （DNA连接酶） 直接修复是最简单的一种DNA损伤修复方式，修复酶直接作用于受损的DNA，将之恢复为原来的结构。 UV Potolyase （光修复酶） 300-600nm 嘧啶二聚体的直接修复 烷基化碱基的直接修复 二、切除修复是最普遍的DNA损伤修复方式 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基错配修复 碱基切除修复（base excision repair） 识别受损的碱基 核苷酸切除修复(nucleotide excision repair, NER）  4步反应组成： 由特殊的蛋白质探测损伤，并引发一系列蛋白质与损伤部位的有序结合。 由特殊的内切酶在损伤部位的两侧切开DNA链，去除2个切口之间的带有损伤的DNA片段，形成缺口。 由DNA pol填补缺口。 由DNA连接酶连接切口 。 识别损伤对DNA双螺旋结构所造成的扭曲。 E.coli的NER主要由4种蛋白质组成： UvrA UvrB UvrC UvrD 核苷酸切除修复 (全基因组修复–真核生物） 核苷酸切除修复 (转录偶联修复 -人类) 着色性干皮病(Xeroderma pigmentosum, XP) 是一种隐性遗传性疾病，有些呈性联遗传。因核酸内切酶异常造成DNA修复障碍所致。临床以光暴露部位色素增加和角化及癌变为特征。 1. 幼年发病，常有家族发病史。 2. 面部等暴露部位出现红斑、褐色斑点及斑片，伴毛细血管扩张，间有色素脱失斑和萎缩或疤痕。皮肤干燥。数年内发生基底细胞癌、鳞癌及恶性黑素瘤。 3.皮肤和眼对日光敏感。 4.病情随年龄逐渐加重，多数患者于20岁前因恶性肿瘤 而死亡。 5.组织病理 晚期出现表皮非典型性增生、日光角化及鳞癌和基底细胞癌等恶性肿瘤。 着色性干皮病患儿脸部特征 着色性干皮病的并发症 着色性干皮病的治疗 避免紫外线照射 避免肿瘤致病因子 对症治疗 碱基错配修复（ mismatch repair） 错配是指非Watson-Crick碱基配对。 碱基错配修复也可被看作是碱基切除修复的一种特殊形式，主要负责纠正： ① 复制与重组中出现的碱基配对错误； ② 因碱基损伤所致的碱基配对错误； ③ 碱基插入； ④ 碱基缺失。 大肠杆菌错配修复系统组成: 甲基化酶（如DNA腺嘌呤甲基化酶，即m6A甲基化酶） DNA polymerase Ⅲ 填补单链 DNA 缺口 Helicase、SSB、核酸外切酶 (Ⅰ和Ⅶ)、连接酶 MCE (mismatch correct enzyme) 3 subunits Mut H, L, S 扫描新生链中错配碱基 识别新生链中非 m6A 的GATC序列 酶切含错配碱基的DNA区段 错配修复 错配修复 MSH（MutS homologs）蛋白 与MutL同源的MLH和PMS蛋白 真核细胞错配修复系统无MutH，也无半甲基化标记母链。 错配修复系统利用冈崎片段连接前的DNA缺口辨别错配碱基所在的DNA链。 真核细胞碱基错配修复系统： 三、DNA严重损伤时需要重组修复 同源重组修复 非同源末端连接的重组修复 双链断裂修复： 同源重组修复（人）:最简单、最常用的双链断裂修复方式需同源序列 X 同源重组修复 非同源末端连接的重组修复 四、某些修复发生在跨越损伤DNA的复制事件之后 重组跨越损伤修复 合成跨越损伤修复 保留错误的修复。 修复大范围的损伤或复制中来不及修复的损伤。 重组跨越损伤修复 ——复制后修复 Rec A,B,C “稀释”效应 “拆东墙补西墙” SOS修复中LexA-RecA操纵子的作用机制 合成跨越损伤修复 常见的DNA损伤修复途径 修复途径 修复对象 参与修复的酶或蛋白 光复活修复 嘧啶二聚体 光复活酶 碱基切除修复 受损的碱基 DNA糖基化酶、无嘌呤嘧