组织培养与植物转基因.ppt

2021/3/14 * 2021/3/14 * 植株再生是基因转移的关键步骤,直接决定能否获得转基因植株。 两种形式: 一种是愈伤组织再生 另一种是直接再生,从外植体直接诱导出芽而不经过愈伤组织的分化。 转墓因植株再生的方式与一般植株再生的方式相同,主要区别是转基因植株的再生受外源基因、载体系统、抗生素、转化过程的影响。 5 转基因植株的再生及其检测方法 5.1 转基因植株再生 2021/3/14 * 常采用报告基因作为标记,以便快速检测。 主要采用分子生物学方法检测,包括:聚合酶链式反应(PCR)、Southern Blot、Northern Blot和Western Blot等方法。 进行分子生物学检测以后还要进行生物学鉴定,以确定基因是否可以正常地表达性状,并稳定地遗传给后代。 如果一些有价值的目的基因被转入,还必须鉴定基因的功能及其表型。 5.2 转基因植株的检测 2021/3/14 * 如转化抗病毒基因:要对转基因植物进行病毒接种,以鉴定抗病毒能力。 若转化的基因为抗除草剂基因:还要对植物喷洒除草剂进行检测。 若转基因植物是食用粮食作物或油料:还要通过转基因植物的安全性检测,以免对人类和环境造成危害。 如果转化的是花色素合成酶基因:则凭肉眼就可直观鉴定花色变化。 2021/3/14 * 2021/3/14 * 6 植物转基因产品的安全性国际大讨论 2021/3/14 * 斑蝶事件:1999年5月,康奈尔大学的一个研究组在《Nature》杂志上发表文章,声称转基因抗虫玉米的花粉飘到一种名叫“马利筋”的杂草上,用马利筋叶片饲喂美国大斑蝶,导致44％的幼虫死亡。 现在这个事件也有了科学的结论: 第一,玉米的花粉非常重,扩散不远,在玉米地以外５米,每一平方厘米马利筋叶片上只找到一个玉米花粉。 第二,2000年开始在美国三个州和加拿大进行的田间试验都证明,抗虫玉米花粉对斑蝶并不构成威胁,实验室试验中用10倍于田间的花粉量来喂大斑蝶的幼虫,也没有发现对其生长发育有影响。 斑蝶减少的真正原因,一是农药的过度使用,二是墨西哥生态环境的破坏。 2021/3/14 * 加拿大“超级杂草”事件:由于基因漂流,在加拿大的油菜地里发现了个别油菜植株可以抗一种、两种或三种除草剂,因而有人称此为“超级杂草”。 事实上,这种油菜在喷施另一种除草剂2,4-Ｄ后即被全部杀死。 应当指出的是,“超级杂草”并不是一个科学术语,而只是一个形象化的比喻,目前并没有证据证明已经有“超级杂草”的存在。 同时,基因漂流并不是从转基因作物开始,而是历来都有。如果没有基因漂流,就不会有进化,世界上也就不会有这么多种的植物和现在的作物栽培品种。 2021/3/14 * 墨西哥玉米事件:2001年11月,美国加州大学伯克莱分校的两位研究人员在《Nature》上发表文章,声称在墨西哥南部Oacaca地区采集的６个玉米地方品种样本中,发现有CaMV 35S启动子及Novartis Btll抗虫玉米中的adh1基因相似序列。 绿色和平组织借此大肆渲染,说墨西哥玉米已经受到了“基因污染”,甚至指责墨西哥小麦玉米改良中心的基因库也可能受到了“基因污染”。 文章发表后受到很多科学家的批评,。所谓测出的35S启动子,经复查证明是假阳性。所称Ｂｔ玉米中的adh1基因已经转到了墨西哥玉米的地方品种,也是假的。 转入Ｂｔ玉米中的基因序列是adh1 -S基因,而作者测出的是玉米中本来就存在的adh1 -IF基因,两者的基因序列完全不同,是两码事。显然作者没有比较这两个序列,审稿人和《 Nature 》编辑部也没有核实。 墨西哥小麦玉米改良中心（CIMMYT）也发表声明指出,经对种质资源库和新近从田间收集的152份材料的检测,在墨西哥任何地区都没有发现35S启动子。 2021/3/14 * 中国Ｂｔ抗虫棉破坏环境事件:2003年６月３日,南京环科所与绿色和平组织在北京召开会议,６月４日《China Daily》上发表了题为“GM Cotton Damage Environment”的文章,亦即“转基因抗虫棉破坏了环境” 。 绿色和平组织也于当天在其网站上刊登了南京环科所、绿色和平组织顾问薛达元先生长达26页的英文报告,从而再次引发国际争论,在欧、美产生巨大反响,成为国际上争论转基因作物安全性的重大事件之一。 2021/3/14 * 6月5日德国《农业报》发表了题为“Chinese Research: large Environment Damage by Bt Cotton”的文章,即:“中国研究:Bt棉破坏环境巨大”。 绿色和平组织的“中国项目主管”卢思聘声称:棉农“将面对不受控制的超级害虫”（这里他又全无科学根据地提出了“超级害虫”的新名词!）,“声称可以减少农药使用的转基因抗