离子交换固相萃取超高效液相色谱串联质谱法同时测定动物组织中的8类非甾体抗炎药残留.docxVIP

离子交换固相萃取超高效液相色谱串联质谱法同时 测定动物组织中的 8 类非甾体抗炎药残留 SymbolmA g/kg;定量限为 10.0 ?25.0 SymbolmA g/kg;添加浓度在 10.0 ?1000.0 SymbolmA g/kg 范围内，牛肉组织中的回收率为 62.9%? 108.4%，相对标准偏差小于 10%；猪肉组织中的回收率为 63.4%? 117.0%，相对标准偏差小于 9%。 1 引 言 非甾体抗炎药（ Nonsteroidal antiinflammatory drugs ， NSAIDS是一类不含甾体结构的化学药物，其作用机制主要是通 过与环氧化酶结合， 阻断花生四烯酸转化为前列腺素， 从而发挥 镇痛、消炎和解热作用？ ?，主要用于哺乳动物乳腺炎、关节炎 及运动性损伤的治疗。 因疗效显著， 成为继抗生素后全球用量最 大的兽药？ : ?。 近年来，有关NSAIDs不良反应的报道逐渐增多，主要是引起肠胃道损伤等？ ?,其残留问题也逐渐引起重视， 部分NSAIDs 的最大允许残留限量已被制订，并已开发配套的检测方法 ？ ■ ?。 目前，报道的检测方法有高效液相色谱法、 液相色谱 ?泊?联质谱 法、气相色谱 ?泊?联质谱法、毛细管电泳法、薄层色谱法和分光 光度法等？1 ?。其中，液相色谱？泊？联质谱法因其高灵敏度和高 选择性，成为NSAIDs残留分析中最常用的手段之一。Jedziniak 等？ : ?建立了动物组织中10种NSAIDs的检测方法。彭涛等？ :? 建立了猪肝中18种NSAIDs的残留分析方法。后者虽然分析药物 数量较多， 但缺少吡唑酮类、 非酸类以及环氧化酶 2抑制剂的昔 布类，对于NSAIDs的多残留分析，方法扩展性不足。 本实验在前期研究的基础上， 扩增了分析物和动物源性食品 种类，以化学结构为分类依据，选取代表 NSAIDs的全部8类的 14 种药物。深入探讨前处理步骤，优化提取剂，选用阳离子交 换固相萃取柱除杂， 有效降低了基质效应， 结合超高效液相色谱 ？ 泊？联质谱仪，建立了牛肉和猪肉组织中 NSAIDs多残留同时分析 方法。本方法简便、可靠，灵敏度满足国际上对动物源食品中 NSAIDs残留限量的要求，适用于多种动物源食品基质，分析目 标物还具有扩展性。 2 实验部分 仪器与试剂 AcquityTM UPLC超高效液相色谱仪，TQdetector三重四极 杆质谱仪， Masslynx 4.1 数据处理系统(美国 Waters 公司)； AcquityTM UPLC BEH C18 (50 mm x 2.1 mm i d , 1.7 SymbolmA m 色谱柱，Oasis?kMCX( 6 mL, 150 mg)固相萃 取柱(美国 Waters 公司)。 标准品：双水杨酯( Sasapyrin, SAS )，尼美舒利 (Nimesulide , NIM),卡洛芬(Carprofen , CPF，氟芬那酸 (Flufe namic acid , FLA),非那西丁( Phe nacetin , PNT , 苄达明(Benzydamine, BEN，吡罗昔康(Piroxicam , PIR), 双氯酚酸（Diclofenac , DC，布洛芬（Ibuprofen , IPF），苯 基丁氮酮（Phenylbutazone , PBZ ,塞来昔布（Celebrex , CEL）, 甲氯芬那酸（Meclofenamic acid , MEC，氟比洛芬 （Flurbiprofen , FPF）,维达洛芬（Vedaprofen , VPF，纯度 99% 均购自德国 Dr. Ehrenstorfer GmbH 公司；乙腈、乙酸 乙酯、甲醇、甲酸、乙酸铵（HPLC级，美国Fisher公司）；氨 水、H3PO4无水Na2SO4（分析纯，北京北化精细化学品 XX公 司）；其它试剂均为优级纯。 实验条件 液相色谱条件 柱温：30 C;流速：0.2 mL/min ;进 样量： 10 SymbolmAL;流动相：乙腈和0.1%甲酸溶液（含0.5 mmol/L 醋酸铵）；梯度洗脱： 0 min， 50%乙腈； 2 min， 70%乙腈； 3 min， 80%乙腈； 4 min ， 90%乙腈； 5 min ， 50%乙腈。 质谱条件 电喷雾离子源，正、负离子扫描（ ESI＋, ESI -）;毛细管电压：ESI +为3.0 kV, ESI-为2.5 kV;源温 度：120 C;去溶剂温度：350 C;锥孔气流：氮气，100 L/h ; 去溶剂气流：氮气，600 L/h ;碰撞气压：氩气，2.40 X 10- 6 Pa; 监测模式：多反应监测，监测条件见表 1。 动物组织中的 8 类非甾体抗炎药残留 2.3 实验