细胞生物学：第十三章细胞衰老.docVIP

第十三章细胞衰老-5凋亡第一节 细胞衰老早期的细胞衰老研究 二、Hayflkk界限 1961年，Hayflick和Moorhead报告说，培养的人二倍体细胞表现出明显的衰老、退化和死亡的过程。若以1：2的比率连续进行传代(群体倍增)，则平均只能传代40—60次，此后细胞就逐渐解体并死亡。Hayflick等的发现很快就得到许多研究者的证实。他们的工作表明，细胞，至少是培养的细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限，这就是有名的Hayflick界限(HayflickLimitation)。Hayflick等的工作是对Carrel等人坚持的关于细胞“不死性”的学说的彻底否定。此外，运用现代的培养技术并不能重复出Carrel所观察到的培养细胞无限生长的现象。 细胞在衰老过程中，其结构会发生深刻的变化。 (一)细胞核的变化 在体外培养的二倍体细胞中发现，细胞核的大小是倍增次数的函数，即随着细胞分裂次数的增加，核不断增大。 细胞核结构的衰老变化中最明显的是核膜的内折(inva画na“。n)，这在培养的人肺成纤维细胞中比较明显。在体内细胞中也可观察到核膜不同程度的内折，神经细胞尤为明显，这种内折与年龄俱增。核膜内折在老年小鼠的普肯耶细胞、海马、垂体前叶及肝细胞中均可观察到。染色质固缩化是衰老细胞核中的另一个重要变化。体外培养的细胞中，晚代细胞的核里可明显看到染色质的固缩化，而早代细胞的核只有轻微的固缩作用。除了培养细胞外，体内细胞，如老年果蝇的细胞，老年灵长类的垂体细胞及大鼠颌下腺的腺泡细胞中，都可观察到染色质的固缩化。染色质固缩作用与染色质蛋白的二硫键有关。此外，在酵母 Sgsl突变体衰老细胞中还观察到核仁裂解为小体的现象。 (二)内质网的变化 Hasan和Glees比较了不同年龄大鼠海马细胞的内质网结构，发现年轻动物的细胞中，糙面内质网发育良好，排列有序；而在年老动物中，这种有序的排列已不复存在，内质网成分弥散性地分散于核周胞质中。在衰老大鼠的侧前庭核及小脑普肯耶细胞中，均观察到糙面内质网解体的趋势。在光学显微镜下用碱性染料染色，可以观察到小鼠和人的大脑及小脑某些神经元中尼氏物质的含量随年龄增长而下降，而尼氏小体实际上代表了内质网和核糖体群。观察体外培养的人胚肺成纤维细胞，发现26次倍增以前的细胞内质网膜腔膨胀扩大，含有不定形的致密物质，且为核糖体所覆盖；而40次倍增以后的细胞内质网膜腔未见膨胀，所含不定形致密物质亦少，且具无核糖体覆盖区段。总的说来，衰老细胞中糙面内质网的总量似乎是减少了。 (三)线粒体的变化 多数研究者的工作表明，细胞中线粒体的数量随年龄增大而减少，而其体积则随年龄增大而增大。例如在衰老小鼠的神经肌肉连接的前突触终末中可以观察到线粒体数量随年龄增大而减少。同时许多报告表明，在小鼠、大鼠及人肝的衰老细胞中，线粒体发生膨大。膨大的线粒体中有时可见到清晰的嵴，偶尔亦会 观察到线粒体内容物呈现网状化并形成多囊体，以及外膜破坏，多囊体释出的情况。 在培养的人成纤维细胞中，还观察到两种不同类型的线粒体：I型固缩紧密，Ⅱ型大而稀疏，通常每个细胞只含一种类型的线粒体；随着倍增次数的增加， I型线粒体越来越多。 (四)致密体的生成 致密体(densebodies)是衰老细胞中常见的一种结构，绝大多数动物细胞在衰老时都会有致密体的积累。除了致密体外，这种细胞成分还有许多不同的名称，如脂褐质(Upofuscin)、老年色素(ageOrsenilepigment)、血褐质(hemofuscin)、脂色素(1ipochrome)、黄色素(yellowpigment)、透明蜡体(hyaloceroid)及残体 (residualbodies)等等。致密体的发现可上溯至19世纪，但只是近年来才逐渐弄清了它们的起源。较近的研究提供了大量证据，表明致密体是由溶酶体或线粒体转化而来。多数致密体具单层膜且有阳性的磷酸酶反应，这和溶酶体是一致的。少数致密体显然是由线粒体转化而来，因为可以看到双层膜结构，有时嵴的结构也依稀可见。脂褐质通常产生自发荧光，它是自由基诱发的脂质过氧化作用的产物。 (五)膜系统的变化 年轻的功能健全的细胞的膜相是典型的液晶相，这种膜的脂双层比较柔韧，脂肪酸链能自由移动，每个脂质分子与其相邻分子之间的位置交换极其频繁，埋藏于其中的蛋白质分子表现出最大的生物学活性。衰老的或有缺陷的膜通常处于凝胶相或固相，这时磷脂的脂肪酸尾被“冻结”了，完全不能自由移动，而膜就变为刚性的了，因此埋藏于其中的蛋白质也就不能再运动了；在机械刺激或压迫等条件下，膜就会出现裂隙，其选择透性