分子生物学课件—蛋白质翻译.ppt

2021/3/23 * 碱性三糖 作用位点在30S亚基上。多种方式抑制核糖体:干扰fMet-tRNA与核糖体的结合;导致mRNA的错读。 2021/3/23 * 嘌呤霉素是AA-tRNA的结构类似物,不需要延伸因子就可以结合在A位。 通过提前释放肽链来抑制蛋白质的合成。 2021/3/23 * 干扰素处理细胞后引起翻译起始抑制和mRNA降解 2021/3/23 * 抗生素在蛋白质合成不同阶段的抑制作用 2021/3/23 * 4.4 蛋白质转运机制 2021/3/23 * 翻译-转运同步机制 蛋白质的合成和运转同时发生。分泌蛋白质大多是以同步机制运输的。 翻译后转运机制 蛋白质从核糖体上释放后才发生运转。在细胞器发育过程中,由细胞质进入细胞器的蛋白质大多是以翻译后运转机制运输的。 2021/3/23 * 蛋白质定位的信息存在于该蛋白质自身结构中,并且通过与膜上特殊受体的相互作用得以表达。信号肽紧接在起始密码之后,大部分是疏水氨基酸。信号肽的长度在13～36个残基。 信号肽的特点: 10～15个疏水氨基酸; N端有带正电荷的氨基酸; C端接近切割点处代数个极性氨基酸;离切割点最近的氨基酸往往带有很短的侧链（Ala, Gly）。 4.5.1 翻译-转运同步机制 2021/3/23 * 机制过程: 分泌蛋白的生物合成开始于核糖体,翻译到大约50个氨基酸残基,信号肽开始从核糖体的大亚基露出,被内质网膜上的受体识别并与之结合。 信号肽过膜后被内质网腔的信号肽酶水解，新生肽随之通过蛋白孔道穿越疏水的双层磷脂。 当核糖体移到mRNA的“终止”密码子，蛋白质合成即告完成，翻译体系解散，膜上的蛋白孔道消失，核糖体重新处于自由状态。 2021/3/23 * 1. 完整的信号肽是保证蛋白质转运的必要条件。 2. 仅有信号肽还不足以保证蛋白质转运的发生,还要求转运蛋白质在信号序列以外的部分有相应的结构变化。 3. 信号序列的切除并不是转运所必需的。 4. 并非所有的转运蛋白都有可降解的信号肽。 信号识别蛋白 2021/3/23 * 新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的主要过程 ①核糖体组装、翻译起始;②位于蛋白质N端的信号肽序列首先被翻译;③SRP与核糖体、GTP以及带有信号肽新生蛋白质相结合,暂时中止肽链延伸;④核糖体-SRP复合物与膜上的受体相结合；⑤GTP水解,释放SRP并进入新一轮循环；⑥肽链重新开始延伸并不断向内腔运输；⑦信号肽被切除；⑧多肽合成结束,核糖体解离并恢复到翻译起始前的状态。 2021/3/23 * 4.5.2 翻译后转运机制 叶绿体和线粒体中有许多蛋白质和酶是由细胞质提供的,其中绝大多数以翻译后运转机制进入细胞器内。 2021/3/23 * 线粒体蛋白质跨膜转运 特征: 通过线粒体膜的蛋白质在运转之前大多数以前体形式存在,它由成熟蛋白质和位于N端的一段前导肽（leader peptide）共同组成,前导肽约含20～80个氨基酸残基,当前体蛋白过膜时，前导肽被多肽酶所水解，释放成熟蛋白质。 蛋白质通过线粒体膜运转是一种需要能量的过程。 蛋白质通过线粒体膜运转时，首先由外膜上的Tom受体复合蛋白识别与分子伴侣相结合的待运转多肽，通过Tom和Tim组成的膜通道进入线粒体内腔。蛋白质跨膜运转时的能量来自线粒体Hsp70引发的ATP水解和膜电位差。 2021/3/23 * Tom:Transporter Outer Membrane Tim:Transporter Inner Membrane 2021/3/23 * 前导肽的作用与性质 拥有前导肽的线粒体蛋白质前体能够跨膜运转进入线粒体,在这一过程中前导肽被水解,前体转变为成熟蛋白,则失去继续跨膜能力。因此，前导肽对线粒体蛋白质的识别和跨膜运转起着关键作用。 前导肽具有如下特性: 带正电荷的碱性氨基酸（特别是精氨酸）含量较为丰富,它们分散于不带电荷的氨基酸序列之间; 缺少带负电荷的酸性氨基酸; 羟基氨基酸（特别是丝氨酸）含量较高; 有形成两亲（既有亲水又有疏水部分）а-螺旋结构的能力。 2021/3/23 * 叶绿体蛋白质的跨膜转运 叶绿体多肽在胞质中的游离核糖体上合成后脱离核糖体并折叠成具有三级结构的蛋白质分子,多肽上某些特定位点结合于只有叶绿体膜上才有的特异受体位点。叶绿体定位信号肽一般有两个部分,第一部分决定该蛋白质能否进入叶绿体基质,第二部分决定该蛋白能否进入类囊体。 2021/3/23 * 叶绿体蛋白质转运有如下特点: 活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内。 叶绿体膜能够特异地与叶绿体蛋白的前体结合。叶绿体膜上有识别叶绿体蛋白质的特异性受体,保证叶绿体蛋白质只能进入叶绿体内,而不是其他细胞器中。 叶绿体前体内可降解序列因植物和蛋