流式细胞术原理及临床应用.pptVIP

2021/3/23 * 细胞周期分析——PI单染 2021/3/23 * 细胞周期分析——ModiFit 分析 2021/3/23 * 细胞周期分析——ModiFit 分析 2021/3/23 * 大鼠生精细胞分析——PI单染 2021/3/23 * 细胞凋亡—PI加Annexin V双染 FITC-Annexin V PI 2021/3/23 * 淋巴细胞亚群分析 CY5.5-CD3 FITC-CD4 PE-CD8 2021/3/23 * 培养细胞表面粘附分子表达 2021/3/23 * 培养细胞表面粘附分子表达 2021/3/23 * FCM样品来源 需要制备细胞悬液 血液、体液等液体样品 培养的细胞 活体组织样品 冰冻组织 固定的组织样品 直接应用 分离后使用 2021/3/23 * 样品制备 细胞分离方法 直接离心沉淀 物理方法分离（超声波、筛网等） 酶消化 如果是固定的组织,先脱蜡,再用物理或化学方法分离 2021/3/23 * 样品染色步骤 PBS洗细胞1~2次 加（荧光）单抗,暗处孵育15~30分钟 如果必需,加荧光二抗,暗处孵育15~30分钟 PBS洗细胞一次 过300目尼龙网 上机检测 2021/3/23 * PI单染测细胞凋亡步骤 制备细胞悬液 PBS洗细胞1次,1000rpm离心10min,去上清。 加PI染液（含PI 50mg/ml, Rnase 50u