高二生物选修基因工程原理和技术课件.pptVIP

基因工程的原理和技术;基因工程的基本操作步骤;一、获得目的基因; 基因组文库 部分基因文库 ;基因组DNA文库;基因文库中不是直接保管相应基因，而是保存受体菌，菌中含基因;利用PCR提取目的基因;PCR的基本原理;前提: 已知目的基因的脱氧核苷酸序列 方法：DNA受热变性解旋为单链、冷却后DNA引物与单链相应互补序列结合、DNA聚合酶作用下延伸合成互补链。;Taq DNA聚合酶（thermus aquaticus);72℃;;模板DNA;;;;;;;从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 利用化学方法人工合成;形成重组DNA分子;将重组DNA分子导入受体细胞;将目的基因导入植物细胞;将目的基因导入动物细胞;将目的基因导入微生物细胞;筛选含有目的基因的受体细胞目的基因的表达;;①检测是否插入目的基因，利用DNA分子杂交技术，目的基因DNA一条链（作探针）与受体细胞中提取的DNA杂交，看是否有杂交带。 ②检测是否转录出了mRNA，利用DNA分子杂交技术，目的基因DNA一条链（作探针）与受体细胞中提取的mRNA杂交，看是否有杂交带。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗体与蛋白质进行抗原－抗体杂交，看是否有杂交带。 ④还可以进行个体水平的鉴定，根据其性状。 提示：①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再与同位素标记的DNA探针杂交；②抗原－抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。 ;32．（8分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗， 饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备 过程相关的图和表。(08江苏); 请根据以上图表回答下列问题。 （1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的 DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要 的特点是 。 （2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数 量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2 为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高 的退火温度？__________。 （3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱 基序列是否有专一性要求？ 。 （4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的 细菌B通常为 。