高等教育蛋白质的生物合成翻译佘.pptxVIP

本章主要内容：● 8.1 遗传密码● 8.2 tRNA的结构、功能与种类● 8.3 核糖体的结构与功能 ● 8.4 蛋白质合成的生物学机制● 8.5 蛋白质前体的加工修饰● 8.6 蛋白质生物合成抑制剂● 8.7 蛋白质的运转机制 蛋白质合成的场所是核糖体 蛋白质合成的模板是 mRNA 模板与氨基酸之间的 接合体是 tRNA 蛋白质合成的原料是 20种a.a 翻译：指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每三个核苷酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。蛋白质的生物合成步骤(1)翻译的起始 核糖体与mRNA结合并与氨酰-tRNA生成起始复合物。(2)肽链的延伸 核糖体沿mRNA 5端向3端移动，开始了从N端向C端的多肽合成，这是蛋白质合成过程中速度最快的阶段。(3)肽链的终止及释放 核糖体从mRNA上解离，准备新一轮合成反应。Contents● 遗传密码——三联子1.1遗传密码——三联子三联子密码定义 mRNA链上每三个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，或肽链合成的起始、终止信号，这三个核苷酸就称为密码子或三联子密码(triplet codon) 。mRNA 5 ′ CUA UGA ACU AGU …CGG 3 ′方向（一）三联子密码的破译首先从数学的角度来考虑：mRNA中有4种核苷酸，蛋白质中有20种a.a。以一种核苷酸代表一种a.a则蛋白质中只能有4种氨基酸，不行。以两种核苷酸作为一个a.a的密码，它们能代表的a.a只有42＝16种，不足20种，也不行。以3个核苷酸代表一个a.a，则可以有43＝64种密码，可以满足编码20种a.a的需要。AUCGACCUGAGCmRNA3′5′4(×)20mRNA AUCGACCUGAGC3′5′42=1620(×)mRNAAUCGACCUGAGC3′5′43=6420(√)三联子密码破译图解说明核甘酸序列氨基酸序列Crick等人首先从遗传学的角度证实此构想是正确的。在模板mRNA中插入或删除一个bp，会改变该密码子以后全部a.a序列。若同时对模板进行插入和删除试验，插入和删除的碱基数一样，后续密码子序列就不会变化，翻译得到的蛋白质序列就保持不变(除了发生突变的那个密码子所代表的a.a之外)。如果同时删去3个核苷酸，翻译产生少一个氨基酸的蛋白质，序列不发生变化。50-60年代破译遗传密码方面的三项重要成果1）Paul Zamecnik等人证实细胞中蛋白质合成的场所。他们把放射性标记的a.a注射到大鼠体内，经过一段时间后取其肝脏，蔗糖梯度沉淀并分析各种细胞成份中的放射性蛋白质。如果注射后数小时（或数天）取的肝脏，所有细胞成份中都带有放射性标记的蛋白质;如果注射后几分钟内即取其肝脏，那么，放射性标记的蛋白质只存在于含有核糖体颗粒的细胞质成份中。2）Francis Crick等人第一次证实只有用三联子密码的形式才能把包含在由AUGC四个字母组成遗传信息（核酸）准确无误地翻译成由20种不同a.a组成的蛋白质序列，实现遗传信息的表达。实验1: 用吖啶类试剂（诱导核苷酸插入或丢失）处理T4噬菌体rII位点上的两个基因，使之发生移码突变（frame-shift），生成完全不同的、没有功能的蛋白质。实验2: 研究烟草坏死卫星病毒发现，其外壳蛋白亚基由400个氨基酸组成，相应的RNA片段长1200个核苷酸，与密码三联子体系正好相吻合。实验3:?以均聚物为模板指导多肽的合成。 在含有tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、a.a等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的a.a顺序由外加的模板来决定。1961年，Nirenberg等以poly(U)作模板时发现合成了多聚Phe ，从而推出UUU代表Phe。以poly(C)及poly(A)做模板分别得到多聚Pro和多聚Lys。实验4:?以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽，?5′ …UGU GUG UGU GUG UGU GUG…3′,不管读码从U开始还是从G开始，都只能有UGU（Cys）及GUG（Val）两种密码子。实验5: 以共聚三核苷酸作为模板可得到有3种a.a组成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种起读方式：5′…UUC UUC UUC UUC UUC…3′或 5′…UCU UCU UCU UCU UCU…3′或 5′…CUU CUU CUU CUU CUU…3′分别产生UUC（Phe）、UCU（Ser）或CUU（Leu）.?多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽：5′…GUA GUA GUA GUA GUA…3′或5′…UAG UAG UAG UAG UAG…3′或5′…AGU