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实验四 还原糖含量测定 1 教学目标 2 教学方法 3 教学过程 4 教学重难点 1 教学目标 2 教学重点、难点 测定原理；操作步骤 依据：原理是核心；严格、不同 测定原理；结果计算 依据：多年教学的情况 3 教学方法 归纳总结法 公式套用法 原理推测法 图片、视频演示 4 教学过程 3 预习实验5’ 4 归纳总结5’ 授课内容15’ 理论5’ 1 2 理论回顾 1 1.什么是还原糖？ 2.还原糖含量测定方法是什么？ 1.还原糖的测定； 2.注意事项 一、原理 反应本质：还原糖+Cu2+——Cu++氧化型糖 第一步：试剂反应 将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀；这种沉淀很快与酒石酸钾反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。 第二步：试剂与还原糖反应 在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀； 第三步：还原糖与指示剂反应 二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点； 二、适用范围及特点 适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等样品时，因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。 本法特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。 本法是国家标准分析方法。 三、试剂 ① 碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜+次甲基蓝（2种） ② 碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠 + NaOH + 亚铁氰化钾（3种） ③ 乙酸锌溶液 ④ 亚铁氰化钾溶液 ⑤ 0.1%葡萄糖标准溶液：准确称取经 98 ～ 100 ℃ 干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入1000 mL容量瓶中，加入5mL盐酸(防止微生物生长)。 四、步骤 4、 测定方法 （1）样品处理——以乳制品为例（8步） 称样、提取、加澄清剂、定容、振摇、静置、过滤、收集。 （2）碱性酒石酸铜溶液的标定 移取试剂、加水、加玻璃珠、加标液9mL、加热、滴定、记录。 记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值。 10mL碱性酒石酸铜溶液相当的葡糖糖的质量为： m1=ρ×V m1——10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量, mg; ρ——葡萄糖标准溶液的浓度,mg／mL； V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。 （3）样品溶液预测 移取试剂、加水、加玻璃珠、加热、滴定、记录。 说明：与标定过程相似，区别为只差一步。 （4）样品溶液测定移取试剂、加水、加玻璃珠、加样液、加热、滴定、记录。 记录消耗样品溶液的总体积。平行操作3次，取平均值。说明：操作步骤与标定完全相同。