第7节电泳分离.pptVIP

第七节 电泳分离;一、电泳的基本理论 1. 原理:; 迁移率与内在特性和外界条件有关 内在特性：颗粒性质（净电荷量，颗粒大小、形状） 外界条件：电场强度、溶液性质、支持体特性 ;影响迁移率的因素： 1）颗粒性质： Q越大、r 越小、形状越接近球形，v 越快。 2）电场强度：每厘米距离的电压差，E越高，v越快。 常压电泳 E：2－10V/cm 电压：100－500V， 大分子物质分离 高压电泳 E：20－200V/cm 电压 500V， 小分子物质分离 3）溶液性质： pH值：影响粒子所带净电荷量的多少，离pI越远，v越快。 （用buffer保持恒定） 离子强度：离子强度越高，v 越低。 通常，缓冲液离子强度在0.02-0.2之间。 4）电渗：在电场中，液体对于固体支持物的相对移动。 应避免用高电渗物质作支持介质。;自由界面电泳：又称移动界面电泳（moving boundary electrophoresis, MBEP），指在没有支持介质的溶液中进行的电泳。 区带电泳:（zone electrophoresis, ZEP）指有支持介质的电泳，待分离物质在支持介质上分离成若干区带。 支持介质的作用:防止电泳过程中